Prolongation de la durée de vie des neutrophiles avec CLON-G et un test de mort spontanée in vitro

La durée de vie moyenne d’un neutrophile est inférieure à 24 h, ce qui limite la recherche fondamentale sur les neutrophiles et l’application des études sur les neutrophiles. Nos recherches antérieures ont indiqué que de multiples voies pourraient intervenir dans la mort spontanée des neutrophiles. Un cocktail a été développé en ciblant simultanément ces voies, les caspases-perméabilisation-inhibition de la nécroptose de la membrane lysosomale et le facteur de stimulation des colonies de granulocytes (CLON-G), qui a prolongé la durée de vie des neutrophiles à plus de 5 jours sans compromettre de manière significative la fonction des neutrophiles. Parallèlement, un protocole fiable et stable pour évaluer la mort des neutrophiles a également été élaboré. Dans ce travail, nous montrons que CLON-G peut prolonger la durée de vie des neutrophiles in vitro à plus de 5 jours, et nous présentons l’allongement de la durée de vie des neutrophiles avec FACS et la microscopie confocale à fluorescence. Ce rapport présente des procédures pour la préparation du CLON-G et présente un essai in vitro de mort spontanée des neutrophiles, qui peut être utilisé pour l’étude des neutrophiles et pour interroger ensuite la mort des neutrophiles, fournissant ainsi une ressource fiable pour la communauté des neutrophiles.