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Abstract

Biology

斯普拉格道利大鼠脂肪组织间充质干细胞的分离和鉴定

Published: April 7th, 2023

DOI:

10.3791/65172

1Doctorado en Ciencias Biológicas y de la Salud, Universidad Autónoma Metropolitana, 2Medical Research Unit in Biochemistry, Specialties Hospital, National Medical Center SXXI, Instituto Mexicano de Seguro Social, 3Department of Agricultural and Animal Production, Division of Biological and Health Science, Universidad Autónoma Metropolitana-Xochimilco, 4Molecular Biology Research Laboratory, Center for Congenital Malformations, Children Hospital of Mexico Federico Gomez (HIMFG)

Abstract

近几十年来,成人间充质细胞彻底改变了分子和细胞生物学。它们可以分化成不同的特化细胞类型,此外还有强大的自我更新、迁移和增殖能力。脂肪组织是间充质细胞侵入性最小、最容易获得的来源之一。据报道,与其他来源相比,它具有更高的产量,以及优越的免疫调节特性。最近,已经发表了从不同组织来源和动物物种获得成年间充质细胞的不同程序。在评估了一些作者的标准后,我们标准化了一种适用于不同目的且易于复制的方法。来自肾周和附睾脂肪组织的基质血管分数(SVF)池使我们能够开发具有最佳形态和功能的原代培养物。观察到细胞粘附在塑料表面上24小时,并表现出成纤维细胞样形态,具有延长和形成集落的趋势。流式细胞术(FC)和免疫荧光(IF)技术用于评估膜标志物CD105,CD9,CD63,CD31和CD34的表达。脂肪来源的干细胞(ASCs)分化成成脂肪谱系的能力也使用多种因素(4μM胰岛素,0.5mM 3-甲基异丁基黄嘌呤和1μM地塞米松)进行评估。48小时后,观察到成纤维细胞样形态逐渐丧失,并且在12天时,确认存在对油红色染色阳性的脂滴。总之,提出了一种程序来获得最佳和功能性ASC培养物以应用于再生医学。

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