माउस सुपीरियर कोलिकुलस में कैल्शियम इमेजिंग

सुपीरियर कोलिकुलस (एससी), सभी कशेरुकियों में एक विकासवादी रूप से संरक्षित मिडब्रेन संरचना, सेरेब्रल कॉर्टेक्स के उद्भव से पहले सबसे परिष्कृत दृश्य केंद्र है। यह ~ 30 प्रकार के रेटिना गैंग्लियन कोशिकाओं (आरजीसी) से प्रत्यक्ष इनपुट प्राप्त करता है, जिसमें प्रत्येक एक विशिष्ट दृश्य सुविधा को एन्कोडिंग करता है। यह अभी भी अस्पष्ट है कि क्या एससी को रेटिना विशेषताएं विरासत में मिलती हैं या क्या एससी में अतिरिक्त और संभावित रूप से नए सिरे से प्रसंस्करण होता है। एससी में दृश्य जानकारी के तंत्रिका कोडिंग को प्रकट करने के लिए, हम यहां जागृत चूहों में दो पूरक तरीकों के साथ दृश्य प्रतिक्रियाओं को ऑप्टिकल रूप से रिकॉर्ड करने के लिए एक विस्तृत प्रोटोकॉल प्रदान करते हैं। एक विधि दो-फोटॉन माइक्रोस्कोपी का उपयोग करके एकल-कोशिका रिज़ॉल्यूशन पर कैल्शियम गतिविधि को चित्रित करने के लिए ओवरलेइंग कॉर्टेक्स को हटा देती है, जबकि दूसरी एक उत्परिवर्ती माउस के पूरे एससी को चित्रित करने के लिए वाइड-फील्ड माइक्रोस्कोपी का उपयोग करती है जिसका कॉर्टेक्स काफी हद तक अविकसित है। यह प्रोटोकॉल इन दो तरीकों का विवरण देता है, जिसमें पशु तैयारी, वायरल इंजेक्शन, हेडप्लेट आरोपण, प्लग आरोपण, डेटा अधिग्रहण और डेटा विश्लेषण शामिल हैं। प्रतिनिधि परिणामों से पता चलता है कि दो-फोटॉन कैल्शियम इमेजिंग एकल-सेल रिज़ॉल्यूशन पर नेत्रहीन न्यूरोनल प्रतिक्रियाओं को प्रकट करती है, और वाइड-फील्ड कैल्शियम इमेजिंग पूरे एससी में तंत्रिका गतिविधि को प्रकट करती है। इन दो विधियों के संयोजन से, कोई भी एससी में तंत्रिका कोडिंग को विभिन्न पैमानों पर प्रकट कर सकता है, और इस तरह के संयोजन को अन्य मस्तिष्क क्षेत्रों पर भी लागू किया जा सकता है।