Поведенческая характеристика мышиной модели синдрома Ангельмана

Summary

В данной рукописи представлен набор высоко воспроизводимых поведенческих тестов для валидации мышиной модели синдрома Ангельмана.

Abstract

В этой рукописи описывается батарея поведенческих тестов, доступных для характеристики фенотипов, подобных синдрому Ангельмана (АС), в установленной мышиной модели АС. Мы используем парадигму ротародного обучения, детальный анализ походки и тест на строительство гнезда для выявления и характеристики двигательных нарушений животных. Мы тестируем эмоциональность животных в открытом поле и на повышенных и лабиринтных тестах, а также аффект в тесте на подвеску хвоста. Когда мыши с синдромом Аспергера тестируются в открытом поле, результаты следует интерпретировать с осторожностью, поскольку двигательные дисфункции влияют на поведение мышей в лабиринте и изменяют показатели активности.

Воспроизводимость и эффективность представленных поведенческих тестов уже была подтверждена на нескольких независимых линиях мышей Uba3a с различными вариантами нокаута, что делает этот набор тестов отличным инструментом валидации в исследованиях АС. Модели с соответствующей конструкцией и валидностью лица потребуют дальнейших исследований для выяснения патофизиологии заболевания и позволят разработать причинно-следственные методы лечения.

Introduction

Синдром Ангельмана (АС) является редким заболеванием развития нервной системы. Наиболее распространенным генетическим происхождением АС является большая делеция участка 15q11-q13 хромосомы материнского происхождения, которая обнаруживается почти у 74%^{пациенток1}. Делеция этой области приводит к потере UBE3A, основного возбудителя АС, кодирующего убиквитин-лигазу E3. Отцовский аллель гена UBE3A в нейронах заглушается в процессе, известном как импринтинг. Как следствие, отцовский импринтинг гена допускает только материнскую экспрессию в центральной нервной системе (ЦНС)². Таким образом, делеция гена UB....

Protocol

Все животные и эксперименты, использованные в этом исследовании, прошли этическую экспертизу и были проведены в соответствии с Европейской директивой 2010/63/EU. Исследование было одобрено Чешской центральной комиссией по защите животных. Мышей помещали в индивидуально вентилируемые кле.......

Discussion

Модели АС, созданные на различных линиях мышей, обычно проверяются с помощью тестов эмоционального состояния, двигательных функций и когнитивных способностей животных, чтобы облегчить сравнение с человеческими симптомами^31,32. Двигательный дефицит в мод.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Cages, individually ventilated	Techniplast
DigiGait	Mouse Specifics, Inc., 2 Central Street Level Unit 110 Framingham, MA 01701, USA	Equipment was tendered, no catalogue  number was provided, nor could be find on company's web site	Detailed analysis of mouse gait, hardware and software provided.
FDA Nestlet squares	Datesand Ltd., 7 Horsfield Way, Bredbury, Stockport SK6, UK	Material was bought from Velaz vendor via direct email request. Velaz do not provide any catalogue no.	Cotton nestlets for nest building test. Nestlet discription: 2-3 g each, with diameter around 5 x 5 x 0.5cm.
Mouse chow	Altramion
Rotarod	TSE Systems GmbH, Barbara-McClintock-Str.4 12489 Berlin, Germany	Equipment was tendered, no catalogue  number was provided, nor could be find on company's web site	Rotarod for 5 mice, hardware and software provided. Drum dimensions: Diameter: 30 mm, width per lane: 50 mm, falling distance 147 mm.
Tail Suspension Test	Bioseb, In Vivo Research Instruments, 13845 Vitrolles FRANCE	Reference: BIO-TST5	Fully automated equipment for immobility time evaluation of 3 mice hanged by tail, hardware and software provided
Transpore medical tape	Medical M, Ltd.	P-AIRO1291	The tape used to attach an animal to the hook by its tail.
Viewer - Video Tracking System	Biobserve GmbH, Wilhelmstr. 23 A 53111 Bonn, Germany	Equipment with software were tendered, no catalogue  number was provided, nor could be find on company's web site	Software with custom made hardware: maze, IR base, IR sensitive cameras. Custom-made OF dimensions: 42 x 42 cm area, 49 cm high wall, central zone area: 39 cm2. A custom-made EPM was elevated 50 cm above the floor, with an open arm 79 cm long,  9 cm wide, and closed arm 77 cm long, 7.6 cm wide.