Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • Representative Results
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

ציפוי מעבדה אנטי-מיקרוביאלי מונע זיהום צולב של הצטברות פתוגנים ודליפה ביולוגית בשוגג. כאן, אנו מתארים את הפרוטוקול לפיתוח בד אנטי-מיקרוביאלי ידידותי לעור באמצעות אנקפסולציה ננו-צמחית ובדיקות סטנדרטיות מותאמות כדי להעריך במדויק את היעילות וההתאמה לשימוש טיפוסי בחלוק המעבדה.

Abstract

מעילי מעבדה נמצאים בשימוש נרחב במעבדות ובמתקני בריאות מסוכנים ביולוגית כבגדי מגן למניעת חשיפה ישירה לפתוגנים, שפיכות וכוויות. מעילי מגן אלה על בסיס כותנה מספקים תנאים אידיאליים לאתרי גדילה וחיבור מיקרוביאליים בשל אופיים הנקבובי, יכולת אחיזת הלחות ושמירת החום מגוף המשתמש. מספר מחקרים הוכיחו את הישרדותם של חיידקים פתוגניים על בגדי בתי חולים ומעילי מעבדה, הפועלים כווקטורים של העברה מיקרוביאלית.

גישה נפוצה לתיקון בעיות אלה היא יישום של חומרים אנטי-מיקרוביאליים בגימור טקסטיל, אך חששות הועלו בשל הרעילות וההשפעות הסביבתיות של כימיקלים סינתטיים רבים. המגפה המתמשכת פתחה גם צוהר לחקירה של תכשירים אנטי-מיקרוביאליים יעילים ופורמולציות ידידותיות לסביבה ונטולות רעלים. מחקר זה משתמש בשתי תרכובות ביו-אקטיביות טבעיות, קרבקרול ותימול, העטופות בננו-חלקיקי צ'יטוסן, המבטיחות הגנה יעילה מפני ארבעה פתוגנים אנושיים עם הפחתה של עד 4 לוגים (99.99%). פתוגנים אלה מזוהים לעתים קרובות במעילי מעבדה המשמשים במעבדות מסוכנות ביולוגית.

הבדים המטופלים גם עמדו בפני עד 10 מחזורי כביסה עם הפחתה מיקרוביאלית של 90%, וזה מספיק לשימוש המיועד. ביצענו שינויים בבדיקות הבד הסטנדרטיות הקיימות כדי לייצג טוב יותר את התרחישים האופייניים לשימוש במעיל מעבדה. חידודים אלה מאפשרים הערכה מדויקת יותר של יעילותם של מעילי מעבדה אנטי-מיקרוביאליים ולסימולציה של גורלן של דליפות מיקרוביאליות מקריות שיש לנטרל תוך זמן קצר. מחקרים נוספים מומלצים כדי לחקור את הצטברות הפתוגנים לאורך זמן על מעילי מעבדה אנטי-מיקרוביאליים בהשוואה למעילי מגן רגילים.

Introduction

החלוק הלבן המגן הוא פריט חובה של ציוד מגן אישי (PPE) במעבדות מיקרוביולוגיה ובמתקני בריאות, והוא מגן מפני חשיפה ישירה לפתוגנים, שפיכות וכוויות. מעילי כותנה אלו מקדמים צמיחה מיקרוביאלית בשל גורמים רבים – הבד הארוג מספק אתרי חיבור ואוורור, כותנה ועמילן המשמשים בתהליך הייצור יחד עם תאי אפיתל מתקלפים מהמשתמש מספקים חומרים מזינים, והקרבה למשתמש מעניקה חום ולחות. הצטברות חיידקים על טקסטיל יכולה גם לגרום לבעיות בריאותיות כגון אלרגיות וזיהום nosocomial, ריחות לא נעימים, הידרדרות בד1.

שלא כמו בגדים רגילים, מעילי מגן נשטפים או מחוטאים לעתים רחוקות, כפי שנמצא בסקרים רבים 2,3

Protocol

1. הכנת ננו-חלקיקים

  1. אנקפסולציה ננו-צמחית
    1. להכין 50 מ"ל של 1% (v/v) חומצה אצטית.
      אזהרה: חומצה אצטית קרחונית היא חומר מגרה, שעלול לגרום לכוויות חמורות בעור ולנזק לעיניים. לבשו מעיל מעבדה באורך מלא, כפפות ניטריל ומשקפי מגן, ועבדו מתחת למכסה מנוע.
    2. הכינו תמיסת צ'יטוזן (1.2% w/v) על ?.......

Representative Results

סינון ראשוני של NPs מסונתזים
בעקבות טכניקת תחליב שמן במיםדו-שלבית 16, התרכובות הביו-אקטיביות (קרבקרול ותימול) נעטפו בהצלחה בצ'יטוזן. זה אושר על ידי ספקטרופוטומטריה UV-Vis עבור ספיגת שיא של תרכובות ביו-אקטיביות בהתאמה בהשוואה לבקרות, שהיו NPs chitosan ללא כל תרכובות ביו-אקטיבי?.......

Discussion

היעילות האנטי-מיקרוביאלית של ביוצידים נבדקת באופן קונבנציונלי על ידי בדיקות כמותיות, כגון ריכוז מעכב מינימלי (MIC) וריכוז חיידקים מינימלי (MBC), שבו החיידקים שקועים בנוזל אנטי-מיקרוביאלי למשך 24 שעות. עם זאת, בדיקות אלה אינן מתאימות לבדים מצופים, שבהם הממשק הנוזלי חסר והביוצידים מפוזרים באיטי?.......

Disclosures

למחברים אין ניגודי עניינים.

Acknowledgements

מחקר זה מומן על ידי "מחקר יישומי, חדשנות ושירותי יזמות" (ARIES), סנטניאל קולג ', קנדה.

....

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
Acetic acidMillipore Sigma64-19-7
Antibiotic base agarBD DifcoDF0270-17-4Also known as Antibiotic Medium 2
Antibiotic seed agarBD DifcoDF0263-17-3Also known as Antibiotic Medium 1
Blood Agar (Nutrient Agar with 5% Sheep Blood)Donated by CFIA
Bromcresol Purple Lactose AgarDonated by CFIA
Candida albicansATCC The Global Bioresource CenterATTC 10231
CarvacrolMillipore Sigma282197 (CAS# 499-75-2)
Centrifuge  Allergra X-22R CentrifugeBeckman CoulterModel # X-22RRefrigerated. Wait at least 20 min or until the temperature reach the set low value (e.g., 4 °C) as the refrigeration takes time.
Chitosan Medium Molecular Weight (CS)Millipore Sigma448877 (CAS # 9012-76-4)
Clamshell Heat PressIntivaIM1200
Escherichia coli (E. coli)ATCC The Global Bioresource CenterATTC 23725
IncubatorThermo Scientific1205M34
Letheen BrothBD DifcoDF0681-17-7Used to neutralize antimicrobial effects. Product from different manufacturers may require to add Polysorbate 80, which is already added in Difco product.
Milli Q waterMillipore SigmaZR0Q16WWDeionized water
Mueller-Hinton AgarBD DifcoDF0252-17-6
Pentasodium tripolyphosphate (TPP)Millipore Sigma238503 (CAS# 7758-29-4)
Phospahte Buffered Saline (PBS)Thermo ScientificAM9624
Pseudomonas aeruginosaATCC The Global Bioresource CenterATTC 9027
Sabouraud Dextrose AgarBD DifcoDF0109-17-1
Shaking incubator/ Thermo shakerVWRModel# SHKA2000
Staphylococcus aureusATCC The Global Bioresource CenterATTC 6538
ThymolMillipore SigmaT0501 (CAS# 89-83-8)
Trypticase Soy AgarBD Difco236950
Trypticase Soy BrothBD Difco215235
Tween 80Millipore SigmaSTS0204 (CAS # 9005-65-6)
UV-Vis SpectrophometerThermo ScientificGENESYS 30 (840-277000)

References

  1. Schmidt-Emrich, S., et al. Rapid assay to assess bacterial adhesion on textiles. Materials. 9 (4), 249 (2016).
  2. Qaday, J., et al. Bacterial contamination of medical doctors and....

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

194

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved