המחברים מודים לצוות האגף לתמיכה במחקר רפואי, למרכז התמיכה במחקר מתקדם (ADRES), ולחברי החטיבה לפתופיזיולוגיה אינטגרטיבית, מרכז פרוטאו-מדע (PROS), אוניברסיטת אהימה (Ehime), על עזרתם הטכנית ותמיכתם המועילה. מחקר זה נתמך בחלקו על ידי האגודה היפנית לקידום המדע (JSPS) מענקי KAKENHI JP17K17929, JP19K16015, JP21K05974 (ל- NS) ו- JP23689066, JP15H04961, JP15K15552, JP17K19728, JP19H03786 (ל- YI); מענקים מקרן המחקר הרפואי של אוסקה למחלות עקשניות, קרן נקטומי, האגודה היפנית לחקר עצמות ומינרלים (JSBMR) מענק כוכבים עולים, קרן סומיטומו, קרן המחקר הרפואי SENSHIN, קרן הזיכרון מוצ'ידה (ל- NS); ומענק מחקר רפואי של קרן המדע טקדה, מענק פרויקט UCB יפן (UCBJ) ומענק JSBMR Frontier Scientist לשנת 2019 (ל-YI).

ניסויים בבעלי חיים אושרו על ידי הוועדה לניסויים בבעלי חיים של אוניברסיטת Ehime ובוצעו בהתאם להנחיות אוניברסיטת Ehime לניסויים בבעלי חיים (37A1-1*16).
1. הכנת מכשירים, ריאגנטים ומדיום תרבית
<ol><li>הכינו את מדיום התרבית באופן הבא: השלימו את מדיום הנשר המעובד של דולבקו (DMEM) עם 10% נ...

חשיפת דלקת מפרקים דלקתית: חקירת תפקודים של תאים סינוביאליים

<ol>
	<li>Smolen, J. S., Aletaha, D., McInnes, I. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rheumatoid+arthritis.">Rheumatoid arthritis.</a> Lancet. 388 (10055), 2023-2038 (2016).</li><li>McInnes, I. B., Schett, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pathogenesis+of+rheumatoid+arthritis.">The pathogenesis of rheumatoid arthritis.</a> The New England Journal of Medicine. 365 (23), 2205-2219 (2011).</li><li>Kurowska-Stolarska, M., Alivernini, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synovial+tissue+macrophages:+friend+or+foe.">Synovial tissue macrophages: friend or foe.</a> RMD Open. 3 (2), (2017).</li><li>Hannemann, N., Apparailly, F., Courties, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synovial+macrophages:+from+ordinary+eaters+to+extraordinary+multitaskers.">Synovial macrophages: from ordinary eaters to extraordinary multitaskers.</a> Trends in Immunology. 42 (5), 368-371 (2021).</li><li>Alivernini, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinct+synovial+tissue+macrophage+subsets+regulate+inflammation+and+remission+in+rheumatoid+arthritis.">Distinct synovial tissue macrophage subsets regulate inflammation and remission in rheumatoid arthritis.</a> Nature Medicine. 26 (8), 1295-1306 (2020).</li><li>Saeki, N., Imai, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reprogramming+of+synovial+macrophage+metabolism+by+synovial+fibroblasts+under+inflammatory+conditions.">Reprogramming of synovial macrophage metabolism by synovial fibroblasts under inflammatory conditions.</a> Cell Communication and Signaling. 18 (1), 188 (2020).</li><li>Armaka, M., Gkretsi, V., Kontoyiannis, D., Kollias, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+standardized+protocol+for+the+isolation+and+culture+of+normal+and+arthritogenic+murine+synovial+fibroblasts.">A standardized protocol for the isolation and culture of normal and arthritogenic murine synovial fibroblasts.</a> Protocol Exchange. , (2009).</li><li>Saeki, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epigenetic+regulator+UHRF1+orchestrates+proinflammatory+gene+expression+in+rheumatoid+arthritis+in+a+suppressive+manner.">Epigenetic regulator UHRF1 orchestrates proinflammatory gene expression in rheumatoid arthritis in a suppressive manner.</a> The Journal of Clinical Investigation. 132 (11), (2022).</li><li>Midwood, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tenascin-C+is+an+endogenous+activator+of+Toll-like+receptor+4+that+is+essential+for+maintaining+inflammation+in+arthritic+joint+disease.">Tenascin-C is an endogenous activator of Toll-like receptor 4 that is essential for maintaining inflammation in arthritic joint disease.</a> Nature Medicine. 15 (7), 774-780 (2009).</li><li>You, D. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metabolically+engineered+stem+cell-derived+exosomes+to+regulate+macrophage+heterogeneity+in+rheumatoid+arthritis.">Metabolically engineered stem cell-derived exosomes to regulate macrophage heterogeneity in rheumatoid arthritis.</a> Science Advances. 7 (23), 0083 (2021).</li><li>Ogawa, K., Tsurutani, M., Hashimoto, A., Soeda, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simple+propagation+method+for+resident+macrophages+by+co-culture+and+subculture,+and+their+isolation+from+various+organs.">Simple propagation method for resident macrophages by co-culture and subculture, and their isolation from various organs.</a> BMC Immunology. 20 (1), 34 (2019).</li><li>Andr&#228;, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+evaluation+of+T-cell+functionality+after+flow+cytometry+sorting+revealed+p38+MAPK+activation.">An evaluation of T-cell functionality after flow cytometry sorting revealed p38 MAPK activation.</a> Cytometry Part A. 97 (2), 171-183 (2020).</li><li>Ryan, K., Rose, R. E., Jones, D. R., Lopez, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sheath+fluid+impacts+the+depletion+of+cellular+metabolites+in+cells+afflicted+by+sorting+induced+cellular+stress+(SICS).">Sheath fluid impacts the depletion of cellular metabolites in cells afflicted by sorting induced cellular stress (SICS).</a> Cytometry Part A. 99 (9), 921-929 (2021).</li><li>Llorente, I., Garc&#237;a-Casta&#241;eda, N., Valero, C., Gonz&#225;lez-&#193;lvaro, I., Casta&#241;eda, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoporosis+in+rheumatoid+arthritis:+dangerous+liaisons.">Osteoporosis in rheumatoid arthritis: dangerous liaisons.</a> Frontiers in Medicine. 7, 601618 (2020).</li><li>Croft, A. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinct+fibroblast+subsets+drive+inflammation+and+damage+in+arthritis.">Distinct fibroblast subsets drive inflammation and damage in arthritis.</a> Nature. 570 (7760), 246-251 (2019).</li><li>Wei, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Notch+signalling+drives+synovial+fibroblast+identity+and+arthritis+pathology.">Notch signalling drives synovial fibroblast identity and arthritis pathology.</a> Nature. 582 (7811), 259-264 (2020).</li></ol>

שיטה זו שפותחה כאן משפרת טכניקות קודמות לבידוד הן SFs מדלקת מפרקים מורין והן מקרופאגים תושבים ממספר איברים 7,11. השיטה המתוקנת יכולה לבודד הן מקרופאגים והן פיברובלסטים מסינוביום דלקתי עם טוהר גבוה, והיא פשוטה וניתנת לשחזור. מכיוון שהשיטה אינה דורשת מכשירים מו...

דלקת מפרקים שגרונית (RA) היא מחלה אוטואימונית המאופיינת בהיפרפלזיה של הסינוביום, המובילה להרס מפרקים 1,2. מקרופאגים ופיברובלסטים שומרי רקמות נמצאים בסינוביום בריא כדי לשמור על הומאוסטזיס משותף. בחולי RA, פיברובלסטים סינוביאליים (SFs) מתרבים, ותאים חיסוניים, כולל מונוציטים, מסתננים לתוך סינוביום ונוזל המפרקים, תהליכים הקשורים לדלקת 1,3,4. מקרופאגים סינוביאליים (SMs), הכוללים מקרופאגים תושבים ומקרופאגים היקפיים שמקורם במונוציטים בדם, ו-SFs מופעלים באופן חריג ויש להם תפקידים חשובים בפתוגנזה של RA. מחקרים אחרונים הראו כי אינטראקציות תא-תא בין SMs ו- SFs תורמות הן להחמרה והן להפוגה של RA 5,6.
כדי להבין את הפתוגנזה של RA, נעשה שימוש במספר מודלים של מכרסמים של דלקת מפרקים דלקתית, כולל דלקת מפרקים בנסיוב K/BxN, דלקת מפרקים הנגרמת על ידי קולגן ודלקת מפרקים הנגרמת על ידי נוגדני קולגן. בדיקות מבוססות תאים נדרשות בדרך כלל כדי להבהיר פונקציות מולקולריות בדלקת פרקים. לכן, תאים ראשוניים ממודלים של בעלי חיים של דלקת פרקים בודדו. השיטה לבידוד SFs מרקמת דלקת מפרקים מורין מבוססת היטב, ותאים אלה תרמו להבהרת מנגנונים מולקולריים בפתוגנזה של דלקת פרקים 7,8. מצד שני, מקרופאגים שמקורם במח עצם, מקרופאגים שמקורם במונוציטים בדם וקווי תאי מקרופאגים שימשו לעתים קרובות כמשאבי מקרופאגים למחקרי דלקת פרקים 9,10. מאחר שמקרופאגים יכולים לרכוש תפקודים הקשורים למיקרו-סביבה שלהם, מקורות כלליים של מקרופאגים עשויים להיות חסרים תגובות ספציפיות לרקמת דלקת פרקים. בנוסף, קשה להשיג מספיק תאים סינוביאליים על ידי מיון, כמו סינוביום murine היא רקמה קטנה מאוד אפילו מודלים דלקת פרקים. חוסר השימוש במקרופאגים סינוביאליים למחקרי מבחנה היווה מגבלה במחקרי דלקת פרקים. הקמת פרוטוקול לבידוד והרחבה של מקרופאגים סינוביאליים תהווה יתרון להבהרת מנגנונים פתולוגיים ב- RA.
בשיטה הקודמת לבידוד SFs, SMs הושלכו7. מלבד זאת, דווח על שיטה לבודד ולהרחיב מקרופאגים מקומיים מאיברים מסוימים11. לכן, פרוטוקולים קיימים שונו בשילוב. השינוי נועד להשיג את התרבות העיקרית של SMs ו- SFs עם טוהר גבוה. המטרה הכוללת של שיטה זו היא לבודד ולהרחיב הן SMs והן SFs מרקמת דלקת מפרקים מורין.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>5.0 g/L Trypsin/5.3 mmol/L EDTA solution</td>
			<td>nacalai tesque</td>
			<td>35556-44</td>
			<td>Diluted with HBSS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antibiotic&#8211;antimycotic (anti/anti)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15240-062</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Butterfly needle</td>
			<td>TERUMO</td>
			<td>SV-23DLK</td>
			<td>23G</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell strainer</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>352340</td>
			<td>40 &#181;m pore, Nylon</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cellmatrix Type I-C</td>
			<td>Nitta gelatin</td>
			<td>637-00773</td>
			<td>Type I-C collagen</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centriguge tube 15</td>
			<td>TPP</td>
			<td>91014</td>
			<td>15 mL tube</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centriguge tube 50</td>
			<td>TPP</td>
			<td>91050</td>
			<td>50 mL tube</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase from C. Histolyticum</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C5138</td>
			<td>Type IV collagenase</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#8217;s Modified Eagle Medium GlutaMax (DMEM)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10569-010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>SIGAM</td>
			<td>173012</td>
			<td>Heat inactivation was performed</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hanks&#39; balanced salt solution (HBSS)</td>
			<td>Wako</td>
			<td>085-09355</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Bio Research Center</td>
			<td>PRI28-1525A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue culture dish 40</td>
			<td>TPP</td>
			<td>93040</td>
			<td>For cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue culture dish 60</td>
			<td>TPP</td>
			<td>92006</td>
			<td>For cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezers</td>
			<td>KFI</td>
			<td>1-9749-31</td>
			<td>Fine-point</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezers</td>
			<td>Bio Research Center</td>
			<td>PRI28-1522</td>
			<td>Serrated tip</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZEISS Stemi 305</td>
			<td>ZEISS</td>
			<td>STEMI305-EDU</td>
			<td>Stereomicroscope</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

isolation and culture of primary synovial macrophages and fibroblasts from murine arthritis tissue

דלקת מפרקים שגרונית היא מחלה אוטואימונית המובילה לדלקת כרונית של המפרקים. מקרופאגים סינוביאליים ופיברובלסטים סינוביאליים ממלאים תפקידים מרכזיים בפתוגנזה של דלקת מפרקים שגרונית. חשוב להבין את תפקידיהן של שתי אוכלוסיות התאים כדי לחשוף את המנגנונים העומדים בבסיס התקדמות פתולוגית והפוגה בדלקת מפרקים דלקתית. באופן כללי, תנאי ניסוי חוץ גופיים צריכים לחקות את הסביבה in vivo ככל האפשר. תאים ראשוניים שמקורם ברקמה שימשו בניסויים המאפיינים פיברובלסטים סינוביאליים בדלקת פרקים. לעומת זאת, בניסויים שחקרו את התפקודים הביולוגיים של מקרופאגים בדלקת מפרקים דלקתית, נעשה שימוש בקווי תאים, מקרופאגים שמקורם במח עצם ומקרופאגים שמקורם במונוציטים בדם. עם זאת, לא ברור אם מקרופאגים כאלה אכן משקפים את תפקודם של מקרופאגים שוכני רקמות. כדי להשיג מקרופאגים מקומיים, פרוטוקולים קודמים שונו כדי לבודד ולהרחיב הן מקרופאגים ראשוניים והן פיברובלסטים מרקמה סינוביאלית במודל עכבר של דלקת מפרקים דלקתית. תאים סינוביאליים ראשוניים אלה עשויים להיות שימושיים לניתוח חוץ גופי של דלקת מפרקים דלקתית.

Rheumatoid arthritis (RA) is an autoimmune disease characterized by hyperplasia of the synovium, leading to joint destruction1,2. Tissue-resident macrophages and fibroblasts are present in healthy synovium to maintain joint homeostasis. In RA patients, synovial fibroblasts (SFs) proliferate, and immune cells, including monocytes, infiltrate into the synovium and joint fluid, processes associated with inflammation1,3,4. Synovial macrophages (SMs), which include resident macrophages and peripheral blood monocyte-derived macrophages, and SFs are aberrantly activated and have important roles in RA pathogenesis. Recent studies have suggested that cell-cell interactions between SMs and SFs contributes to both the exacerbation and remission of RA5,6. 
To understand RA pathogenesis, several rodent models of inflammatory arthritis have been used, including K/BxN serum transfer arthritis, collagen-induced arthritis, and collagen antibody-induced arthritis. Cell-based assays are generally required to clarify molecular functions in arthritis. Therefore, primary cells from animal models of arthritis have been isolated. The method to isolate SFs from murine arthritis tissue is well established, and these cells have contributed to the elucidation of molecular mechanisms in arthritis pathogenesis7,8. On the other hand, bone marrow-derived macrophages, blood monocyte-derived macrophages, and macrophage cell lines have often been used as macrophage resources for arthritis studies9,10. Since macrophages can acquire functions associated with their microenvironment, general sources of macrophages may lack responses specific to arthritis tissue. In addition, it is difficult to obtain enough synovial cells by sorting, as murine synovium is a very small tissue even in arthritis models. The lack of usage of synovial macrophages for in vitro studies has been a limitation in arthritis studies. The establishment of a protocol to isolate and expand synovial macrophages would be an advantage for the elucidation of pathological mechanisms in RA.
In the previous method to isolate SFs, SMs were discarded7. Besides that, a method to isolate and expand resident macrophages from some organs was reported11. Therefore, existing protocols were modified in combination. The modification aims to achieve the primary culture of both SMs and SFs with high purity. The overall goal of this method is to isolate and expand both SMs and SFs from murine arthritis tissue.

מחבר זרקור: בידוד ותרבות של מקרופאגים סינוביאליים ראשוניים ופיברובלסטים מרקמת דלקת מפרקים מורין  

בידוד ותרבית של מקרופאגים סינוביאליים ראשוניים ופיברובלסטים מרקמת דלקת מפרקים מורין

Cell-based assays are required to clarify molecular functions. In arthritis studies, the method to isolate primary cells is well established in synovial fibroblasts, but not in synovial macrophages. Therefore, we developed a protocol to isolate and expand both synovial macrophages and synovial fibroblasts from arthritis models.Primary synovial fibroblasts from murine arthritis tissue have contributed to the elucidation of molecular mechanisms in arthritis pathogenesis. On the other hand, bone marrow-derived macrophages, blood monocyte-derived macrophages, and macrophage cell lines have often been used as macrophage resources for arthritis studies. Since macrophages can acquire functions associated with their microenvironment, general sources of macrophages may lack responses specific to arthritis tissue.In addition, it is difficult to obtain enough synovial cells by sorting, as murine synovium is a very small tissue even in arthritis models. In the previous method to isolate synovial fibroblasts, synovial macrophages were discarded. Besides that, a method to isolate and expand resident macrophages from some organs was reported.Therefore, existing protocols were modified in combination to isolate and expand both synovial macrophages and synovial fibroblasts from murine arthritis tissue. This method can isolate both macrophages and fibroblasts from inflammatory synovium with high purity, and it is simple and reproducible. This method allows the expansion of synovial macrophages under co-culture with synovial fibroblasts.Also, the method provides an advantage, in that synovial fibroblasts can be used with fewer passages. The established protocol would be an advantage for elucidation of pathological mechanisms in rheumatoid arthritis.

נקבות עכברי C57BL/6 בגיל 7-8 שבועות עברו דלקת מפרקים הנגרמת על ידי נוגדני קולגן. תאים דמויי מקרופאגים ותאים דמויי פיברובלסטים בודדו באופן עצמאי מרקמת דלקת מפרקים דלקתית בהתאם להליך שתואר לעיל (איור 2A,B). תאים דמויי מקרופאגים שימשו מיד לאחר שלב 5.7. תאים דמויי פיברובלסטים...

Watch this Scientific Journal Video about Isolation and Culture of Primary Synovial Macrophages and Fibroblasts from Murine Arthritis Tissue at JoVE.com

המחקר הנוכחי מספק פרוטוקול שונה לבידוד מקרופאגים סינוביאליים ופיברובלסטים מרקמת דלקת מפרקים דלקתית מורין.

Rheumatoid arthritis is an autoimmune disease that leads to chronic inflammation of joints. Synovial macrophages and synovial fibroblasts have central ...

בדיקות מבוססות תאים נדרשות כדי להבהיר פונקציות מולקולריות. במחקרי דלקת פרקים, השיטה לבידוד תאים ראשוניים מבוססת היטב בפיברובלסטים סינוביאליים, אך לא במקרופאגים סינוביאליים. לכן, פיתחנו פרוטוקול לבידוד והרחבה של מקרופאגים סינוביאליים ופיברובלסטים סינוביאליים ממודלים של דלקת פרקים.פיברובלסטים סינוביאליים ראשוניים מרקמת דלקת מפרקים מורין תרמו להבהרת מנגנונים מולקולריים בפתוגנזה של דלקת פרקים. מצד שני, מקרופאגים שמקורם במח עצם, מקרופאגים שמקורם במונוציטים בדם ושורות תאי מקרופאגים שימשו לעתים קרובות כמשאבי מקרופאגים למחקרי דלקת פרקים. מאחר שמקרופאגים יכולים לרכוש תפקודים הקשורים למיקרו-סביבה שלהם, מקורות כלליים של מקרופאגים עשויים להיות חסרים תגובות ספציפיות לרקמת דלקת פרקים.בנוסף, קשה להשיג מספיק תאים סינוביאליים על ידי מיון, כמו סינוביום murine היא רקמה קטנה מאוד אפילו מודלים דלקת פרקים. בשיטה הקודמת לבידוד פיברובלסטים סינוביאליים הושלכו מקרופאגים סינוביאליים. מלבד זאת, דווח על שיטה לבודד ולהרחיב מקרופאגים מקומיים מאיברים מסוימים.לכן, הפרוטוקולים הקיימים שונו בשילוב כדי לבודד ולהרחיב הן מקרופאגים סינוביאליים והן פיברובלסטים סינוביאליים מרקמת דלקת מפרקים מורין. שיטה זו יכולה לבודד הן מקרופאגים והן פיברובלסטים מסינוביום דלקתי עם טוהר גבוה, והיא פשוטה וניתנת לשחזור. שיטה זו מאפשרת הרחבה של מקרופאגים סינוביאליים תחת תרבית משותפת עם פיברובלסטים סינוביאליים.כמו כן, השיטה מספקת יתרון, בכך שניתן להשתמש בפיברובלסטים סינוביאליים עם פחות מעברים. הפרוטוקול שנקבע יהווה יתרון להבהרת מנגנונים פתולוגיים בדלקת מפרקים שגרונית.

בידוד ותרבית של מקרופאגים סינוביאליים ראשוניים ופיברובלסטים מרקמת דלקת מפרקים מורין

Abstract