Yazarlar, Tıbbi Araştırma Destek Bölümü, İleri Araştırma Destek Merkezi (ADRES) personeline ve Ehime Üniversitesi Proteo-Bilim Merkezi (PROS) Bütünleştirici Patofizyoloji Bölümü üyelerine teknik yardımları ve yardımcı destekleri için teşekkür eder. Bu çalışma kısmen Japonya Bilimi Teşvik Derneği (JSPS) KAKENHI hibeleri JP17K17929, JP19K16015, JP21K05974 (NS'ye) ve JP23689066, JP15H04961, JP15K15552, JP17K19728, JP19H03786 (YI'ye); Osaka İnatçı Hastalıklar Tıbbi Araştırma Vakfı, Nakatomi Vakfı, Japon Kemik ve Mineral Araştırmaları Derneği (JSBMR) Yükselen Yıldızlar Hibesi, Sumitomo Vakfı, SENSHIN Tıbbi Araştırma Vakfı, Mochida Memorial Vakfı (NS'ye); ve Takeda Bilim Vakfı Tıbbi Araştırma hibesi, UCB Japonya (UCBJ) proje hibesi ve JSBMR Frontier Scientist hibesi 2019 (YI'ye).

Hayvanları içeren deneyler, Ehime Üniversitesi Hayvan Deneyleri Komitesi tarafından onaylandı ve Ehime Üniversitesi Hayvan Deneyleri Yönergesi'ne (37A1-1*16) uygun olarak gerçekleştirildi.
1. Aletlerin, reaktiflerin ve kültür ortamının hazırlanması
<ol><li>Kültür ortamını aşağıdaki gibi hazırlayın: Dulbecco'nun Modifiye Eagle Medium'unu (DMEM) %10 fetal sığır serumu (FBS) ve %1 antibiyotik-antimikotik solüsyon (anti-anti) ile takviye edin.</li>
	<...

İnflamatuar Artritin Ortaya Çıkarılması: Sinovyal Hücrelerin İşlevlerini Keşfetmek

<ol>
	<li>Smolen, J. S., Aletaha, D., McInnes, I. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rheumatoid+arthritis.">Rheumatoid arthritis.</a> Lancet. 388 (10055), 2023-2038 (2016).</li><li>McInnes, I. B., Schett, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pathogenesis+of+rheumatoid+arthritis.">The pathogenesis of rheumatoid arthritis.</a> The New England Journal of Medicine. 365 (23), 2205-2219 (2011).</li><li>Kurowska-Stolarska, M., Alivernini, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synovial+tissue+macrophages:+friend+or+foe.">Synovial tissue macrophages: friend or foe.</a> RMD Open. 3 (2), (2017).</li><li>Hannemann, N., Apparailly, F., Courties, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synovial+macrophages:+from+ordinary+eaters+to+extraordinary+multitaskers.">Synovial macrophages: from ordinary eaters to extraordinary multitaskers.</a> Trends in Immunology. 42 (5), 368-371 (2021).</li><li>Alivernini, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinct+synovial+tissue+macrophage+subsets+regulate+inflammation+and+remission+in+rheumatoid+arthritis.">Distinct synovial tissue macrophage subsets regulate inflammation and remission in rheumatoid arthritis.</a> Nature Medicine. 26 (8), 1295-1306 (2020).</li><li>Saeki, N., Imai, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reprogramming+of+synovial+macrophage+metabolism+by+synovial+fibroblasts+under+inflammatory+conditions.">Reprogramming of synovial macrophage metabolism by synovial fibroblasts under inflammatory conditions.</a> Cell Communication and Signaling. 18 (1), 188 (2020).</li><li>Armaka, M., Gkretsi, V., Kontoyiannis, D., Kollias, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+standardized+protocol+for+the+isolation+and+culture+of+normal+and+arthritogenic+murine+synovial+fibroblasts.">A standardized protocol for the isolation and culture of normal and arthritogenic murine synovial fibroblasts.</a> Protocol Exchange. , (2009).</li><li>Saeki, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epigenetic+regulator+UHRF1+orchestrates+proinflammatory+gene+expression+in+rheumatoid+arthritis+in+a+suppressive+manner.">Epigenetic regulator UHRF1 orchestrates proinflammatory gene expression in rheumatoid arthritis in a suppressive manner.</a> The Journal of Clinical Investigation. 132 (11), (2022).</li><li>Midwood, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tenascin-C+is+an+endogenous+activator+of+Toll-like+receptor+4+that+is+essential+for+maintaining+inflammation+in+arthritic+joint+disease.">Tenascin-C is an endogenous activator of Toll-like receptor 4 that is essential for maintaining inflammation in arthritic joint disease.</a> Nature Medicine. 15 (7), 774-780 (2009).</li><li>You, D. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metabolically+engineered+stem+cell-derived+exosomes+to+regulate+macrophage+heterogeneity+in+rheumatoid+arthritis.">Metabolically engineered stem cell-derived exosomes to regulate macrophage heterogeneity in rheumatoid arthritis.</a> Science Advances. 7 (23), 0083 (2021).</li><li>Ogawa, K., Tsurutani, M., Hashimoto, A., Soeda, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simple+propagation+method+for+resident+macrophages+by+co-culture+and+subculture,+and+their+isolation+from+various+organs.">Simple propagation method for resident macrophages by co-culture and subculture, and their isolation from various organs.</a> BMC Immunology. 20 (1), 34 (2019).</li><li>Andr&#228;, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+evaluation+of+T-cell+functionality+after+flow+cytometry+sorting+revealed+p38+MAPK+activation.">An evaluation of T-cell functionality after flow cytometry sorting revealed p38 MAPK activation.</a> Cytometry Part A. 97 (2), 171-183 (2020).</li><li>Ryan, K., Rose, R. E., Jones, D. R., Lopez, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sheath+fluid+impacts+the+depletion+of+cellular+metabolites+in+cells+afflicted+by+sorting+induced+cellular+stress+(SICS).">Sheath fluid impacts the depletion of cellular metabolites in cells afflicted by sorting induced cellular stress (SICS).</a> Cytometry Part A. 99 (9), 921-929 (2021).</li><li>Llorente, I., Garc&#237;a-Casta&#241;eda, N., Valero, C., Gonz&#225;lez-&#193;lvaro, I., Casta&#241;eda, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoporosis+in+rheumatoid+arthritis:+dangerous+liaisons.">Osteoporosis in rheumatoid arthritis: dangerous liaisons.</a> Frontiers in Medicine. 7, 601618 (2020).</li><li>Croft, A. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinct+fibroblast+subsets+drive+inflammation+and+damage+in+arthritis.">Distinct fibroblast subsets drive inflammation and damage in arthritis.</a> Nature. 570 (7760), 246-251 (2019).</li><li>Wei, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Notch+signalling+drives+synovial+fibroblast+identity+and+arthritis+pathology.">Notch signalling drives synovial fibroblast identity and arthritis pathology.</a> Nature. 582 (7811), 259-264 (2020).</li></ol>

Burada geliştirilen bu yöntem, hem SF'leri murin artritinden hem de yerleşik makrofajları bir dizi organdan izole etmek için önceki teknikleri geliştirir 7,11. Modifiye yöntem, hem makrofajları hem de fibroblastları enflamatuar sinovyumdan yüksek saflıkta izole edebilir ve basit ve tekrarlanabilir. Yöntem, hücre sıralayıcı gibi karmaşık aletler gerektirmediğinden, herkes bunu gerçekleştirebilir. Ek olarak, mevcut teknik, antikorlarla tedavi ...

Romatoid artrit (RA), sinovyumun hiperplazisi ile karakterize, eklem yıkımına yol açan otoimmün bir hastalıktır 1,2. Dokuda yerleşik makrofajlar ve fibroblastlar, eklem homeostazını korumak için sağlıklı sinovyumda bulunur. RA hastalarında, sinovyal fibroblastlar (SF'ler) çoğalır ve monositler de dahil olmak üzere bağışıklık hücreleri, inflamasyonla ilişkili süreçlerolan sinovyum ve eklem sıvısına sızar 1,3,4. Yerleşik makrofajları ve periferik kan monosit kaynaklı makrofajları içeren sinovyal makrofajlar (SM'ler) ve SF'ler anormal bir şekilde aktive olurlar ve RA patogenezinde önemli rollere sahiptirler. Son çalışmalar, SM'ler ve SF'ler arasındaki hücre-hücre etkileşimlerinin RA5,6'nın hem alevlenmesine hem de remisyonuna katkıda bulunduğunu göstermiştir.
RA patogenezini anlamak için, K/BxN serum transfer artriti, kollajen kaynaklı artrit ve kollajen antikoru kaynaklı artrit dahil olmak üzere çeşitli kemirgen inflamatuar artrit modelleri kullanılmıştır. Artritte moleküler fonksiyonları açıklığa kavuşturmak için genellikle hücre bazlı tahliller gereklidir. Bu nedenle, hayvan artrit modellerinden birincil hücreler izole edilmiştir. SF'leri murin artrit dokusundan izole etme yöntemi iyi bilinmektedir ve bu hücreler artrit patogenezinde moleküler mekanizmaların aydınlatılmasına katkıda bulunmuştur 7,8. Öte yandan, kemik iliği kaynaklı makrofajlar, kan monosit kaynaklı makrofajlar ve makrofaj hücre hatları, artrit çalışmaları için sıklıkla makrofaj kaynakları olarak kullanılmıştır 9,10. Makrofajlar mikroçevreleri ile ilişkili işlevler kazanabildiklerinden, genel makrofaj kaynakları artrit dokusuna özgü yanıtlardan yoksun olabilir. Ayrıca murin sinovyum artrit modellerinde bile çok küçük bir doku olduğu için sıralama ile yeterli sinovyal hücre elde etmek zordur. İn vitro çalışmalarda sinovyal makrofajların kullanılmaması artrit çalışmalarında bir sınırlama olmuştur. Sinovyal makrofajları izole etmek ve genişletmek için bir protokolün oluşturulması, RA'daki patolojik mekanizmaların aydınlatılması için bir avantaj olacaktır.
SF'leri izole etmek için önceki yöntemde, SM'ler atıldı7. Bunun yanı sıra, yerleşik makrofajları bazı organlardan izole etmek ve genişletmek için bir yöntem bildirilmiştir11. Bu nedenle, mevcut protokoller kombinasyon halinde değiştirildi. Değişiklik, hem SM'lerin hem de SF'lerin birincil kültürünü yüksek saflıkta elde etmeyi amaçlamaktadır. Bu yöntemin genel amacı, hem SM'leri hem de SF'leri murin artrit dokusundan izole etmek ve genişletmektir.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>5.0 g/L Trypsin/5.3 mmol/L EDTA solution</td>
			<td>nacalai tesque</td>
			<td>35556-44</td>
			<td>Diluted with HBSS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antibiotic&#8211;antimycotic (anti/anti)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15240-062</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Butterfly needle</td>
			<td>TERUMO</td>
			<td>SV-23DLK</td>
			<td>23G</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell strainer</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>352340</td>
			<td>40 &#181;m pore, Nylon</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cellmatrix Type I-C</td>
			<td>Nitta gelatin</td>
			<td>637-00773</td>
			<td>Type I-C collagen</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centriguge tube 15</td>
			<td>TPP</td>
			<td>91014</td>
			<td>15 mL tube</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centriguge tube 50</td>
			<td>TPP</td>
			<td>91050</td>
			<td>50 mL tube</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase from C. Histolyticum</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C5138</td>
			<td>Type IV collagenase</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#8217;s Modified Eagle Medium GlutaMax (DMEM)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10569-010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>SIGAM</td>
			<td>173012</td>
			<td>Heat inactivation was performed</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hanks&#39; balanced salt solution (HBSS)</td>
			<td>Wako</td>
			<td>085-09355</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Bio Research Center</td>
			<td>PRI28-1525A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue culture dish 40</td>
			<td>TPP</td>
			<td>93040</td>
			<td>For cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue culture dish 60</td>
			<td>TPP</td>
			<td>92006</td>
			<td>For cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezers</td>
			<td>KFI</td>
			<td>1-9749-31</td>
			<td>Fine-point</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezers</td>
			<td>Bio Research Center</td>
			<td>PRI28-1522</td>
			<td>Serrated tip</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZEISS Stemi 305</td>
			<td>ZEISS</td>
			<td>STEMI305-EDU</td>
			<td>Stereomicroscope</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

isolation and culture of primary synovial macrophages and fibroblasts from murine arthritis tissue

Romatoid artrit, eklemlerin kronik iltihaplanmasına yol açan otoimmün bir hastalıktır. Romatoid artrit patogenezinde sinovyal makrofajlar ve sinovyal fibroblastlar merkezi rol oynarlar. İnflamatuar artritte patolojik progresyon ve remisyonun altında yatan mekanizmaları ortaya çıkarmak için her iki hücre popülasyonunun fonksiyonlarını anlamak önemlidir. Genel olarak in vitro deneysel koşullar, mümkün olduğunca in vivo ortamı taklit etmelidir. Primer doku kaynaklı hücreler, artritte sinovyal fibroblastları karakterize eden deneylerde kullanılmıştır. Buna karşılık, inflamatuar artritte makrofajların biyolojik fonksiyonlarını araştıran deneylerde, hücre hatları, kemik iliği kaynaklı makrofajlar ve kan monosit kaynaklı makrofajlar kullanılmıştır. Bununla birlikte, bu tür makrofajların aslında dokuda yerleşik makrofajların işlevlerini yansıtıp yansıtmadığı belirsizdir. Yerleşik makrofajlar elde etmek için, önceki protokoller, inflamatuar artrit fare modelinde sinovyal dokudan hem primer makrofajları hem de fibroblastları izole etmek ve genişletmek için değiştirildi. Bu primer sinovyal hücreler, inflamatuar artritin in vitro analizi için yararlı olabilir.

Rheumatoid arthritis (RA) is an autoimmune disease characterized by hyperplasia of the synovium, leading to joint destruction1,2. Tissue-resident macrophages and fibroblasts are present in healthy synovium to maintain joint homeostasis. In RA patients, synovial fibroblasts (SFs) proliferate, and immune cells, including monocytes, infiltrate into the synovium and joint fluid, processes associated with inflammation1,3,4. Synovial macrophages (SMs), which include resident macrophages and peripheral blood monocyte-derived macrophages, and SFs are aberrantly activated and have important roles in RA pathogenesis. Recent studies have suggested that cell-cell interactions between SMs and SFs contributes to both the exacerbation and remission of RA5,6. 
To understand RA pathogenesis, several rodent models of inflammatory arthritis have been used, including K/BxN serum transfer arthritis, collagen-induced arthritis, and collagen antibody-induced arthritis. Cell-based assays are generally required to clarify molecular functions in arthritis. Therefore, primary cells from animal models of arthritis have been isolated. The method to isolate SFs from murine arthritis tissue is well established, and these cells have contributed to the elucidation of molecular mechanisms in arthritis pathogenesis7,8. On the other hand, bone marrow-derived macrophages, blood monocyte-derived macrophages, and macrophage cell lines have often been used as macrophage resources for arthritis studies9,10. Since macrophages can acquire functions associated with their microenvironment, general sources of macrophages may lack responses specific to arthritis tissue. In addition, it is difficult to obtain enough synovial cells by sorting, as murine synovium is a very small tissue even in arthritis models. The lack of usage of synovial macrophages for in vitro studies has been a limitation in arthritis studies. The establishment of a protocol to isolate and expand synovial macrophages would be an advantage for the elucidation of pathological mechanisms in RA.
In the previous method to isolate SFs, SMs were discarded7. Besides that, a method to isolate and expand resident macrophages from some organs was reported11. Therefore, existing protocols were modified in combination. The modification aims to achieve the primary culture of both SMs and SFs with high purity. The overall goal of this method is to isolate and expand both SMs and SFs from murine arthritis tissue.

Yazar Spotlight: Murin Artrit Dokusundan Primer Sinovyal Makrofajların ve Fibroblastların İzolasyonu ve Kültürü  

Murin Artrit Dokusundan Primer Sinovyal Makrofaj ve Fibroblastların İzolasyonu ve Kültürü

Cell-based assays are required to clarify molecular functions. In arthritis studies, the method to isolate primary cells is well established in synovial fibroblasts, but not in synovial macrophages. Therefore, we developed a protocol to isolate and expand both synovial macrophages and synovial fibroblasts from arthritis models.Primary synovial fibroblasts from murine arthritis tissue have contributed to the elucidation of molecular mechanisms in arthritis pathogenesis. On the other hand, bone marrow-derived macrophages, blood monocyte-derived macrophages, and macrophage cell lines have often been used as macrophage resources for arthritis studies. Since macrophages can acquire functions associated with their microenvironment, general sources of macrophages may lack responses specific to arthritis tissue.In addition, it is difficult to obtain enough synovial cells by sorting, as murine synovium is a very small tissue even in arthritis models. In the previous method to isolate synovial fibroblasts, synovial macrophages were discarded. Besides that, a method to isolate and expand resident macrophages from some organs was reported.Therefore, existing protocols were modified in combination to isolate and expand both synovial macrophages and synovial fibroblasts from murine arthritis tissue. This method can isolate both macrophages and fibroblasts from inflammatory synovium with high purity, and it is simple and reproducible. This method allows the expansion of synovial macrophages under co-culture with synovial fibroblasts.Also, the method provides an advantage, in that synovial fibroblasts can be used with fewer passages. The established protocol would be an advantage for elucidation of pathological mechanisms in rheumatoid arthritis.

7-8 haftalıkken dişi C57BL/6 farelerine kollajen antikoru kaynaklı artrit uygulandı. Makrofaj benzeri hücreler ve fibroblast benzeri hücreler, yukarıda tarif edilen prosedüre göre inflamatuar artrit dokusundan bağımsız olarak izole edildi (Şekil 2A,B). Makrofaj benzeri hücreler adım 5.7'den hemen sonra kullanıldı. Fibroblast benzeri hücreler başlangıçta adım 4.4'ten sonra alt birleşim olacak şekilde kültürlendi ve daha sonra yeni bir kültür kabın...

Watch this Scientific Journal Video about Isolation and Culture of Primary Synovial Macrophages and Fibroblasts from Murine Arthritis Tissue at JoVE.com

Bu çalışma, sinovyal makrofajları ve fibroblastları murin inflamatuar artrit dokusundan izole etmek için modifiye edilmiş bir protokol sunmaktadır.

Rheumatoid arthritis is an autoimmune disease that leads to chronic inflammation of joints. Synovial macrophages and synovial fibroblasts have central ...

Moleküler fonksiyonları açıklığa kavuşturmak için hücre bazlı tahliller gereklidir. Artrit çalışmalarında, primer hücreleri izole etme yöntemi sinovyal fibroblastlarda iyi bilinmektedir, ancak sinovyal makrofajlarda değildir. Bu nedenle, artrit modellerinden hem sinovyal makrofajları hem de sinovyal fibroblastları izole etmek ve genişletmek için bir protokol geliştirdik.Murin artrit dokusundan primer sinovyal fibroblastlar, artrit patogenezinde moleküler mekanizmaların aydınlatılmasına katkıda bulunmuştur. Öte yandan, kemik iliği kaynaklı makrofajlar, kan monosit kaynaklı makrofajlar ve makrofaj hücre hatları, artrit çalışmaları için sıklıkla makrofaj kaynakları olarak kullanılmıştır. Makrofajlar mikroçevreleri ile ilişkili işlevler kazanabildiklerinden, genel makrofaj kaynakları artrit dokusuna özgü yanıtlardan yoksun olabilir.Ayrıca murin sinovyum artrit modellerinde bile çok küçük bir doku olduğu için sıralama ile yeterli sinovyal hücre elde etmek zordur. Sinovyal fibroblastları izole etmek için önceki yöntemde, sinovyal makrofajlar atılmıştı. Bunun yanı sıra, yerleşik makrofajları bazı organlardan izole etmek ve genişletmek için bir yöntem bildirilmiştir.Bu nedenle, murin artrit dokusundan hem sinovyal makrofajları hem de sinovyal fibroblastları izole etmek ve genişletmek için mevcut protokoller kombinasyon halinde değiştirildi. Bu yöntem hem makrofajları hem de fibroblastları inflamatuar sinovyumdan yüksek saflıkta izole edebilir ve basit ve tekrarlanabilir. Bu yöntem, sinovyal fibroblastlarla ko-kültür altında sinovyal makrofajların genişlemesine izin verir.Ayrıca, yöntem, sinovyal fibroblastların daha az geçişle kullanılabilmesi açısından bir avantaj sağlar. Oluşturulan protokol romatoid artritte patolojik mekanizmaların aydınlatılmasında avantaj sağlayacaktır.

Murin Artrit Dokusundan Primer Sinovyal Makrofaj ve Fibroblastların İzolasyonu ve Kültürü

Abstract