मानव ग्लियोब्लास्टोमा सेल व्यवहार के विवो और एक्स विवो विश्लेषण के लिए एक मॉडल के रूप में चूजा भ्रूण मस्तिष्क का उपयोग करना

चूजा भ्रूण कशेरुक विकास के अध्ययन के लिए एक आदर्श मॉडल प्रणाली रही है, विशेष रूप से प्रयोगात्मक जोड़तोड़ के लिए। चूजे के भ्रूण का उपयोग विवो में मानव ग्लियोब्लास्टोमा (जीबीएम) मस्तिष्क ट्यूमर के गठन और आसपास के मस्तिष्क के ऊतकों में ट्यूमर कोशिकाओं की आक्रामकता का अध्ययन करने के लिए बढ़ाया गया है। जीबीएम ट्यूमर ओवो में ई 5 मिडब्रेन (ऑप्टिक टेक्टम) वेंट्रिकल में फ्लोरोसेंटली लेबल कोशिकाओं के निलंबन के इंजेक्शन से बन सकता है।

जीबीएम कोशिकाओं के आधार पर, कॉम्पैक्ट ट्यूमर यादृच्छिक रूप से वेंट्रिकल में और मस्तिष्क की दीवार के भीतर बनते हैं, और कोशिकाओं के समूह मस्तिष्क की दीवार के ऊतकों पर आक्रमण करते हैं। ट्यूमर के साथ निश्चित ई 15 टेक्टा के मोटे ऊतक खंड (350 μm) को यह प्रकट करने के लिए इम्यूनोस्टेन्ड किया जा सकता है कि हमलावर कोशिकाएं अक्सर रक्त वाहिकाओं के साथ पलायन करती हैं जब कॉन्फोकल जेड-स्टैक छवियों के 3 डी पुनर्निर्माण द्वारा विश्लेषण किया जाता है। लाइव ई 15 मिडब्रेन और फोरब्रेन स्लाइस (250-350 μm) को झिल्ली डालने पर सुसंस्कृत किया जा सकता है, जहां फ्लोरोसेंटली लेबल वाले जीबीएम कोशिकाओं को गैर-यादृच्छिक स्थानों में पेश किया जा सकता है ताकि सेल आक्रमण का विश्लेषण करने के लिए पूर्व विवो सह-संस्कृतियों को प्रदान किया जा सके, जो लगभग 1 सप्ताह की अवधि में रक्त वाहिकाओं के साथ भी हो सकता है। लाइव सेल व्यवहार का निरीक्षण करने के लिए इन पूर्व विवो सह-संस्कृतियों की निगरानी वाइडफील्ड या कॉन्फोकल फ्लोरेसेंस टाइम-लैप्स माइक्रोस्कोपी द्वारा की जा सकती है।

सह-सुसंस्कृत स्लाइस को तब कॉन्फोकल माइक्रोस्कोपी द्वारा तय, इम्यूनोस्टेन्ड और विश्लेषण किया जा सकता है ताकि यह निर्धारित किया जा सके कि आक्रमण रक्त वाहिकाओं या अक्षतंतु के साथ हुआ है या नहीं। इसके अतिरिक्त, सह-संस्कृति प्रणाली का उपयोग विभिन्न सटीक स्थानों में विभिन्न सेल प्रकारों और रंगों के समुच्चय रखकर और सेल आंदोलनों का अवलोकन करके संभावित सेल-सेल इंटरैक्शन की जांच के लिए किया जा सकता है। दवा उपचार पूर्व विवो संस्कृतियों पर किया जा सकता है, जबकि ये उपचार इन ओवो सिस्टम के साथ संगत नहीं हैं। ये दो पूरक दृष्टिकोण मानव जीबीएम सेल व्यवहार और अत्यधिक मैनिपुलेबल कशेरुक मस्तिष्क वातावरण में ट्यूमर गठन के विस्तृत और सटीक विश्लेषण की अनुमति देते हैं।