استخدام دماغ جنين الفرخ كنموذج للتحليلات داخل الجسم الحي وخارج الجسم الحي لسلوك خلايا الورم الأرومي الدبقي البشري

كان جنين الفرخ نظاما نموذجيا مثاليا لدراسة تطور الفقاريات ، خاصة للتلاعب التجريبي. تم توسيع استخدام جنين الفرخ لدراسة تكوين أورام الدماغ بالورم الأرومي الدبقي البشري (GBM) في الجسم الحي وغزو الخلايا السرطانية في أنسجة المخ المحيطة. يمكن تشكيل أورام GBM عن طريق حقن معلق للخلايا الموسومة بالفلورسنت في البطين E5 للدماغ المتوسط (القفص البصري) في البيض.

اعتمادا على خلايا GBM ، تتشكل الأورام المدمجة بشكل عشوائي في البطين وداخل جدار الدماغ ، وتغزو مجموعات من الخلايا أنسجة جدار الدماغ. يمكن تلطيخ أقسام الأنسجة السميكة (350 ميكرومتر) من E15 tecta الثابتة مع الأورام للكشف عن أن الخلايا الغازية غالبا ما تهاجر على طول الأوعية الدموية عند تحليلها عن طريق إعادة بناء ثلاثية الأبعاد لصور z-stack متحدة البؤر. يمكن زراعة شرائح الدماغ المتوسط والدماغ الأمامي E15 الحية (250-350 ميكرومتر) على إدخالات غشائية ، حيث يمكن إدخال خلايا GBM ذات العلامات الفلورية في مواقع غير عشوائية لتوفير ثقافات مشتركة خارج الجسم الحي لتحليل غزو الخلايا ، والذي يمكن أن يحدث أيضا على طول الأوعية الدموية ، على مدى حوالي 1 أسبوع. يمكن مراقبة هذه الثقافات المشتركة خارج الجسم الحي بواسطة الفحص المجهري الفاصل الزمني الفلوري واسع المجال أو متحد البؤر لمراقبة سلوك الخلية الحية.

يمكن بعد ذلك تثبيت الشرائح المستزرعة بشكل مشترك وتلطيخها وتحليلها بواسطة الفحص المجهري متحد البؤر لتحديد ما إذا كان الغزو قد حدث على طول الأوعية الدموية أو المحاور أم لا. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن استخدام نظام الاستزراع المشترك للتحقيق في التفاعلات المحتملة بين الخلايا والخلايا عن طريق وضع مجاميع من أنواع وألوان مختلفة من الخلايا في مواقع دقيقة مختلفة ومراقبة حركات الخلايا. يمكن إجراء العلاجات الدوائية على مزارع خارج الجسم الحي ، في حين أن هذه العلاجات غير متوافقة مع نظام البويضات . يسمح هذان النهجان المتكاملان بإجراء تحليلات مفصلة ودقيقة لسلوك خلايا GBM البشرية وتكوين الورم في بيئة دماغية فقارية يمكن التلاعب بها بشكل كبير.