使用小鸡胚胎大脑作为人类胶质母细胞瘤细胞行为的 体内 和 离体 分析模型

雏鸡胚胎一直是研究脊椎动物发育的理想模型系统，特别是对于实验操作。雏鸡胚胎的使用已被扩展到研究 体内 人胶质母细胞瘤（GBM）脑肿瘤的形成以及肿瘤细胞对周围脑组织的侵袭性。GBM肿瘤可以通过将荧光标记的细胞悬浮液注射到 蛋中的E5中脑（视顶）脑室中来形成。

根据GBM细胞的不同，紧凑的肿瘤在脑室和脑壁内随机形成，细胞群侵入脑壁组织。可以对带有肿瘤的固定E15 tecta的厚组织切片（350μm）进行免疫染色，以揭示通过共聚焦z-stack图像的3D重建进行分析时，入侵细胞通常沿血管迁移。活E15中脑和前脑切片（250-350μm）可以在膜插入物上培养，其中荧光标记的GBM细胞可以引入非随机位置以提供 离体 共培养以分析细胞侵袭，这也可以沿着血管发生，在大约1周的时间内。这些 离体 共培养可以通过宽场或共聚焦荧光延时显微镜进行监测，以观察活细胞的行为。

然后，可以通过共聚焦显微镜固定，免疫染色和分析共培养的切片，以确定侵袭是否沿着血管或轴突发生。此外，共培养系统可用于研究潜在的细胞间相互作用，方法是将不同细胞类型和颜色的聚集体放置在不同的精确位置并观察细胞运动。药物治疗可以在 离体 培养物上进行，而这些治疗与 卵内 系统不兼容。这两种互补的方法允许在高度可操纵的脊椎动物大脑环境中对人类GBM细胞行为和肿瘤形成进行详细和精确的分析。