병아리 배아 뇌를 인간 교모세포종 세포 행동의 생체 내 및 생체 외 분석을 위한 모델로 사용

병아리 배아는 척추동물 발달 연구, 특히 실험적 조작을 위한 이상적인 모델 시스템이었습니다. 병아리 배아의 사용은 생체 내에서 인간 교모세포종(GBM) 뇌종양의 형성 및 주변 뇌 조직으로의 종양 세포의 침습성을 연구하기 위해 확장되었다. GBM 종양은 난소의 E5 중뇌(시신경) 심실에 형광 표지된 세포의 현탁액을 주입함으로써 형성될 수 있습니다.

GBM 세포에 따라 조밀한 종양이 심실과 뇌벽 내에서 무작위로 형성되고 세포 그룹이 뇌벽 조직을 침범합니다. 종양이 있는 고정된 E15 tecta의 두꺼운 조직 절편(350μm)을 면역염색하여 공초점 z-스택 이미지의 3D 재구성으로 분석할 때 침입 세포가 종종 혈관을 따라 이동한다는 것을 밝힐 수 있습니다. 살아있는 E15 중뇌 및 전뇌 절편(250-350 μm)은 막 삽입물에서 배양할 수 있으며, 여기서 형광 표지된 GBM 세포를 비무작위 위치에 도입하여 약 1주일 동안 혈관을 따라 발생할 수 있는 세포 침습을 분석하기 위한 생체 외 공동 배양을 제공할 수 있습니다. 이러한 생체 외 공동 배양은 광시야 또는 컨포칼 형광 타임랩스 현미경으로 모니터링하여 살아있는 세포 거동을 관찰할 수 있습니다.

그런 다음 공동 배양된 조각을 고정, 면역 염색 및 공초점 현미경으로 분석하여 침윤이 혈관 또는 축삭을 따라 발생했는지 여부를 결정할 수 있습니다. 또한 공동 배양 시스템은 서로 다른 정확한 위치에 서로 다른 세포 유형 및 색상의 응집체를 배치하고 세포 움직임을 관찰하여 잠재적인 세포-세포 상호 작용을 조사하는 데 사용할 수 있습니다. 약물 치료는 생체 외 배양에서 수행할 수 있지만 이러한 처리는 생체 내 시스템과 호환되지 않습니다. 이 두 가지 보완적인 접근 방식을 통해 고도로 조작 가능한 척추동물 뇌 환경에서 인간 GBM 세포 행동과 종양 형성에 대한 상세하고 정확한 분석이 가능합니다.