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Biochemistry

高通量筛选以获得用于蛋白质晶体学的晶体命中

Published: March 10th, 2023

DOI:

10.3791/65211

1National High-Throughput Crystallization Center, Hauptman-Woodward Medical Research Institute, 2Department of Biochemistry, Jacobs School of Medicine and Biomedical Sciences, The State University of New York

Abstract

X射线晶体学是识别大分子结构最常用的技术,但是将蛋白质结晶成适合衍射的有序晶格的关键步骤仍然具有挑战性。生物分子的结晶在很大程度上是由实验定义的,这个过程可能是劳动密集型的,对资源有限机构的研究人员来说是令人望而却步的。在国家高通量结晶 (HTX) 中心,已经实施了高度可重复的方法以促进晶体生长,包括自动化高通量 1,536 孔微批次油下板设置,旨在对广泛的结晶参数进行采样。在 6 周内使用最先进的成像模式监测板,以深入了解晶体生长情况,并准确区分有价值的晶体命中。此外,实施用于识别晶体命中的训练有素的人工智能评分算法,再加上用于查看实验图像的开源、用户友好界面,简化了分析晶体生长图像的过程。这里描述了用于制备混合物和结晶板、对板进行成像以及识别命中的关键程序和仪器,以确保可重复性并增加成功结晶的可能性。

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