Abstract
Biochemistry
X-ışını kristalografisi, makromoleküler yapıları ayırt etmek için en yaygın kullanılan tekniktir, ancak bir proteini kırınıma uygun düzenli bir kafese kristalize etmenin önemli adımı zor olmaya devam etmektedir. Biyomoleküllerin kristalleşmesi büyük ölçüde deneysel olarak tanımlanmıştır ve bu süreç sınırlı kaynak kurumlardaki araştırmacılar için emek yoğun ve engelleyici olabilir. Ulusal Yüksek Verimli Kristalizasyon (HTX) Merkezi'nde, kristalleşme parametrelerinin geniş bir genişliğini örneklemek için tasarlanmış otomatik yüksek verimli 1.536 kuyucuklu mikroparti-yağ altı plaka kurulumu da dahil olmak üzere kristal büyümesini kolaylaştırmak için yüksek oranda tekrarlanabilir yöntemler uygulanmıştır. Plakalar, kristal büyümesi hakkında fikir vermek ve değerli kristal vuruşlarını doğru bir şekilde ayırt etmek için 6 hafta boyunca en son teknoloji görüntüleme yöntemleri kullanılarak izlenir. Ayrıca, kristal vuruşlarını tanımlamak için eğitimli bir yapay zeka puanlama algoritmasının uygulanması, deneysel görüntüleri görüntülemek için açık kaynaklı, kullanıcı dostu bir arayüzle birleştiğinde, kristal büyüme görüntülerini analiz etme sürecini kolaylaştırır. Burada, kokteyllerin ve kristalizasyon plakalarının hazırlanması, plakaların görüntülenmesi ve isabetlerin tekrarlanabilirliği sağlayacak ve başarılı kristalleşme olasılığını artıracak şekilde tanımlanması için anahtar prosedürler ve enstrümantasyon açıklanmaktadır.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved