JoVE Logo

Sign In

Abstract

Neuroscience

In Vivo Beeldvorming van de hele hersenen van zebravislarven met behulp van driedimensionale fluorescentiemicroscopie

Published: April 28th, 2023

DOI:

10.3791/65218

1School of Electrical Engineering, KAIST, 2Department of Biology, Chungnam National University, 3KAIST Institute for Health Science and Technology

Abstract

Als gewerveld modeldier worden larvale zebravissen veel gebruikt in de neurowetenschappen en bieden ze een unieke kans om de activiteit van de hele hersenen op cellulaire resolutie te volgen. Hier bieden we een geoptimaliseerd protocol voor het uitvoeren van beeldvorming van de hele hersenen van larvale zebravissen met behulp van driedimensionale fluorescentiemicroscopie, inclusief monstervoorbereiding en immobilisatie, monsterinbedding, beeldacquisitie en visualisatie na beeldvorming. Het huidige protocol maakt in vivo beeldvorming van de structuur en neuronale activiteit van een larvale zebravisbrein mogelijk met een cellulaire resolutie gedurende meer dan 1 uur met behulp van confocale microscopie en op maat ontworpen fluorescentiemicroscopie. De kritieke stappen in het protocol worden ook besproken, waaronder monstermontage en -positionering, het voorkomen van bellenvorming en stof in de agarose-gel en het vermijden van beweging in beelden veroorzaakt door onvolledige stolling van de agarose-gel en verlamming van de vis. Het protocol is gevalideerd en bevestigd in meerdere instellingen. Dit protocol kan eenvoudig worden aangepast voor het in beeld brengen van andere organen van een larvale zebravis.

Explore More Videos

Neurowetenschappen

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved