Abstract
Neuroscience
كحيوان نموذجي للفقاريات ، تستخدم اليرقات الزرد على نطاق واسع في علم الأعصاب وتوفر فرصة فريدة لمراقبة نشاط الدماغ بالكامل بدقة خلوية. هنا ، نقدم بروتوكولا محسنا لإجراء تصوير كامل للدماغ لسمك الزرد اليرقي باستخدام الفحص المجهري الفلوري ثلاثي الأبعاد ، بما في ذلك تحضير العينات وتجميدها ، وتضمين العينات ، والحصول على الصور ، والتصور بعد التصوير. يتيح البروتوكول الحالي التصوير في الجسم الحي للبنية والنشاط العصبي لدماغ الزرد اليرقية بدقة خلوية لأكثر من 1 ساعة باستخدام الفحص المجهري متحد البؤر والفحص المجهري الفلوري المصمم خصيصا. كما تمت مناقشة الخطوات الحاسمة في البروتوكول ، بما في ذلك تركيب العينات وتحديد مواقعها ، ومنع تكوين الفقاعات والغبار في هلام الأغاروز ، وتجنب الحركة في الصور الناتجة عن التصلب غير الكامل لهلام الأغاروز وشلل الأسماك. تم التحقق من صحة البروتوكول وتأكيده في إعدادات متعددة. يمكن تكييف هذا البروتوكول بسهولة لتصوير الأعضاء الأخرى لسمك الزرد اليرقات.
Explore More Videos
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved