体内 使用三维荧光显微镜对斑马鱼幼虫进行全脑成像

作为一种脊椎动物模型动物，斑马鱼幼虫广泛用于神经科学，并为以细胞分辨率监测全脑活动提供了独特的机会。在这里，我们提供了一种优化的方案，用于使用三维荧光显微镜对斑马鱼幼虫进行全脑成像，包括样品制备和固定、样品包埋、图像采集和成像后的可视化。目前的协议能够使用共聚焦显微镜和定制设计的荧光显微镜以细胞分辨率对幼虫斑马鱼大脑的结构和神经元活动进行 体内 成像超过1小时。还讨论了方案中的关键步骤，包括样品安装和定位，防止琼脂糖凝胶中的气泡形成和灰尘，以及避免由于琼脂糖凝胶不完全凝固和鱼麻痹而导致的图像运动。该协议已在多种设置中得到验证和确认。该协议可以很容易地适用于斑马鱼幼虫的其他器官成像。