İn Vivo Üç Boyutlu Floresan Mikroskobu Kullanılarak Zebra Balığı Larvalarının Tüm Beyin Görüntülemesi

Omurgalı model bir hayvan olarak, larva zebra balığı nörobilimde yaygın olarak kullanılmaktadır ve tüm beyin aktivitesini hücresel çözünürlükte izlemek için eşsiz bir fırsat sunmaktadır. Burada, numune hazırlama ve immobilizasyon, numune gömme, görüntü toplama ve görüntüleme sonrası görselleştirme dahil olmak üzere üç boyutlu floresan mikroskobu kullanarak larva zebra balıklarının tüm beyin görüntülemesini gerçekleştirmek için optimize edilmiş bir protokol sunuyoruz. Mevcut protokol, larva zebra balığı beyninin yapısının ve nöronal aktivitesinin, konfokal mikroskopi ve özel olarak tasarlanmış floresan mikroskobu kullanılarak 1 saatten fazla bir süre hücresel çözünürlükte in vivo görüntülenmesini sağlar. Protokoldeki kritik adımlar da tartışılmaktadır, numune montajı ve konumlandırma, agaroz jelinde kabarcık oluşumunu ve tozu önleme ve agaroz jelinin eksik katılaşması ve balığın felç edilmesinden kaynaklanan görüntülerde hareketten kaçınma dahil olmak üzere. Protokol birden fazla ayarda doğrulanmış ve onaylanmıştır. Bu protokol, larva zebra balıklarının diğer organlarını görüntülemek için kolayca uyarlanabilir.