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Biology

小鼠肠隐窝和单个干细胞的类器官的3D培养用于类器官研究

Published: April 7th, 2023

DOI:

10.3791/65219

1Suntory Foundation for Life Sciences, Bioorganic Research Institute, 2Institute for Integrated Cell-Material Sciences (KUIAS-iCeMS), Kyoto University, 3Faculty of Medicine, Osaka Medical and Pharmaceutical University

目前,类器官培养是 体外 研究不同生物学方面和不同器官疾病的重要工具。小鼠小肠隐窝在3D细胞外基质中培养时可以形成类器官,模仿肠上皮。类器官由实现各种肠道稳态功能的所有细胞类型组成。这些包括潘氏细胞、肠内分泌细胞、肠细胞、杯状细胞和簇状细胞。将表征良好的分子添加到培养基中以富集含有G蛋白偶联受体5的富含亮氨酸的重复标记的肠道干细胞(ISC),并用于驱动特定谱系的分化;这些分子包括表皮生长因子,Noggin(一种骨形态发生蛋白)和R-spondin 1。此外,还详细介绍了从单个产生促红细胞生成素的肝细胞受体 B2 (EphB2) 阳性 ISC 生成类器官的方案。在这种方法的文章中,描述了从组织中分离小肠隐窝和单个ISC并确保类器官有效建立的技术。

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