मुराइन इंटेस्टाइनल क्रिप्ट्स से ऑर्गेनोइड्स की 3 डी खेती और ऑर्गेनॉइड रिसर्च के लिए एक एकल स्टेम सेल

वर्तमान में, ऑर्गेनॉइड संस्कृति विभिन्न अंगों में विभिन्न जैविक पहलुओं और बीमारियों के इन विट्रो अध्ययन के लिए एक महत्वपूर्ण उपकरण का प्रतिनिधित्व करती है। मुराइन छोटे आंतों के क्रिप्ट ऑर्गेनोइड बना सकते हैं जो 3 डी बाह्य मैट्रिक्स में सुसंस्कृत होने पर आंतों के उपकला की नकल करते हैं। ऑर्गेनोइड्स सभी सेल प्रकारों से बने होते हैं जो विभिन्न आंतों के होमियोस्टैटिक कार्यों को पूरा करते हैं। इनमें पनेथ कोशिकाएं, एंटरोएंडोक्राइन कोशिकाएं, एंटरोसाइट्स, गोब्लेट कोशिकाएं और टफ्ट कोशिकाएं शामिल हैं। अच्छी तरह से विशेषता वाले अणुओं को आंतों के स्टेम कोशिकाओं (आईएससी) को समृद्ध करने के लिए संस्कृति माध्यम में जोड़ा जाता है, जो जी प्रोटीन-युग्मित रिसेप्टर 5 युक्त ल्यूसीन युक्त दोहराव के साथ लेबल किया जाता है और विशिष्ट वंशों में भेदभाव को चलाने के लिए उपयोग किया जाता है; इन अणुओं में एपिडर्मल ग्रोथ फैक्टर, नोगिन (एक हड्डी मोर्फोजेनेटिक प्रोटीन), और आर-स्पोंडिन 1 शामिल हैं। इसके अतिरिक्त, एकल एरिथ्रोपोइटिन-उत्पादक हेपेटोसेलुलर रिसेप्टर बी 2 (एएफबी 2) -पॉजिटिव आईएससी से ऑर्गेनोइड उत्पन्न करने के लिए एक प्रोटोकॉल भी विस्तृत है। इस विधि लेख में, ऊतकों से छोटे आंतों के क्रिप्ट और एक एकल आईएससी को अलग करने और ऑर्गेनोइड्स की कुशल स्थापना सुनिश्चित करने की तकनीकों का वर्णन किया गया है।