オルガノイド研究のためのマウス腸陰窩および単一幹細胞からのオルガノイドの3D培養

現在、オルガノイド培養は、さまざまな臓器におけるさまざまな生物学的側面や疾患の in vitro 研究のための重要なツールです。マウス小腸陰窩は、3D細胞外マトリックスで培養すると腸上皮を模倣するオルガノイドを形成することができます。オルガノイドは、さまざまな腸の恒常性機能を果たすすべての細胞タイプで構成されています。これらには、パネート細胞、腸内分泌細胞、腸細胞、杯細胞、および房細胞が含まれます。十分に特徴付けられた分子を培養培地に添加して、Gタンパク質共役受容体5を含むロイシンリッチリピートで標識された腸幹細胞(ISC)を濃縮し、特定の系統の分化を促進するために使用されます。これらの分子には、上皮成長因子、ノギン(骨形成タンパク質)、およびR-スポンジン1が含まれます。さらに、単一のエリスロポエチン産生肝細胞受容体B2(EphB2)陽性ISCからオルガノイドを生成するためのプロトコルも詳細に説明されています。この方法の記事では、小腸陰窩と単一のISCを組織から分離し、オルガノイドの効率的な確立を確実にする技術について説明します。