Abstract
Biology
현재 오가노이드 배양은 다양한 장기의 다양한 생물학적 측면과 질병에 대한 시험관 내 연구를 위한 중요한 도구입니다. 쥐 소장 선와(small intestinal crypt)는 3D 세포외 기질(extracellular matrix)에서 배양될 때 장 상피를 모방하는 오가노이드(organoid)를 형성할 수 있습니다. 오가노이드는 다양한 장 항상성 기능을 수행하는 모든 세포 유형으로 구성됩니다. 여기에는 Paneth 세포, 장 내분비 세포, 장 세포, 잔 세포 및 술 세포가 포함됩니다. 잘 특성화된 분자를 배양 배지에 첨가하여 G 단백질 결합 수용체 5를 포함하는 류신이 풍부한 반복으로 표지된 장 줄기 세포(ISC)를 풍부하게 하고 특정 계통을 따라 분화를 유도하는 데 사용됩니다. 이러한 분자에는 표피 성장 인자, Noggin(뼈 형태 형성 단백질) 및 R-spondin 1이 포함됩니다. 또한 단일 에리스로포이에틴 생성 간세포 수용체 B2(EphB2) 양성 ISC에서 오가노이드를 생성하는 프로토콜도 자세히 설명되어 있습니다. 이 방법 기사에서는 조직에서 소장 선와와 단일 ISC를 분리하고 오가노이드의 효율적인 확립을 보장하는 기술에 대해 설명합니다.
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