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Biology

歯髄幹細胞の初代培養

Published: May 5th, 2023

DOI:

10.3791/65223

1Department of Biophysics, PGIMER, 2Unit of Oral and Maxillofacial Surgery, Department of Oral Health Sciences, PGIMER
* These authors contributed equally

Abstract

ヒトの歯髄は、抜歯した歯から採取できる卓越した再生能力を備えた有望な多能性幹細胞リザーバーです。歯髄幹細胞(DPSC)の神経堤由来の外部間葉系起源は、組織の修復と再生におけるその多面的な利点に起因する高度な可塑性をもたらします。成体幹細胞を回収、維持、増殖させるための実用的な方法が数多くあり、再生医療での使用が検討されています。本研究では、外植片培養法による歯科組織からの初代間葉系幹細胞培養の確立を実証する。単離された細胞は紡錘形をしており、培養プレートのプラスチック表面に付着していました。これらの幹細胞の表現型の特徴付けは、CD90、CD73、CD105などのMSCの国際細胞治療学会(ISCT)が推奨する細胞表面マーカーの陽性発現を示しました。さらに、造血マーカー(CD45)および内皮マーカー(CD34)の発現はごくわずかであり、HLA-DRマーカーの発現は2%未満であり、DPSC培養の均一性と純度が確認されました。さらに、脂肪形成系、骨形成系、軟骨形成系への分化に基づいて、それらの多能性を示しました。また、これらの細胞を対応する刺激媒体を添加することにより、肝臓様細胞および神経細胞様細胞に分化するように誘導しました。この最適化されたプロトコルは、実験室や前臨床試験に利用される間葉系幹細胞の高度に拡張可能な集団の培養に役立ちます。同様のプロトコルは、DPSCベースの治療を実践するための臨床セットアップに組み込むことができます。

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