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Biology

Cultivo primario de células madre de pulpa dental

Published: May 5th, 2023

DOI:

10.3791/65223

1Department of Biophysics, PGIMER, 2Unit of Oral and Maxillofacial Surgery, Department of Oral Health Sciences, PGIMER
* These authors contributed equally

Abstract

La pulpa dental humana representa un prometedor reservorio de células madre multipotente con una competencia regenerativa preeminente que se puede extraer de un diente extraído. El origen ectomesenquimal derivado de la cresta neural de las células madre de la pulpa dental (DPSC) otorga un alto grado de plasticidad que se debe a sus beneficios multifacéticos en la reparación y regeneración de tejidos. Existen varias formas prácticas de recolectar, mantener y proliferar células madre adultas que se están investigando para su uso en medicina regenerativa. En este trabajo, demostramos el establecimiento de un cultivo primario de células madre mesenquimales a partir de tejido dental mediante el método de cultivo de explantes. Las células aisladas tenían forma de huso y se adherían a la superficie plástica de la placa de cultivo. La caracterización fenotípica de estas células madre mostró una expresión positiva de los marcadores de superficie celular recomendados por la Sociedad Internacional de Terapia Celular (ISCT) para MSC, como CD90, CD73 y CD105. Además, la expresión insignificante de marcadores hematopoyéticos (CD45) y endoteliales (CD34), y menos del 2% de expresión de marcadores HLA-DR, confirmaron la homogeneidad y pureza de los cultivos DPSC. Además, ilustramos su multipotencia basada en la diferenciación a linajes adipogénicos, osteogénicos y cronogénicos. También indujimos a estas células a diferenciarse en células de tipo hepático y neuronales mediante la adición de los medios de estimulación correspondientes. Este protocolo optimizado ayudará en el cultivo de una población altamente expandible de células madre mesenquimales para ser utilizada en el laboratorio o para estudios preclínicos. Se pueden incorporar protocolos similares en las configuraciones clínicas para practicar tratamientos basados en DPSC.

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