Gebruik van het MicroSiM (μSiM) barrièreweefselplatform voor het modelleren van de bloed-hersenbarrière

De microSiM (μSiM) is een op membraan gebaseerd kweekplatform voor het modelleren van de bloed-hersenbarrière (BBB). In tegenstelling tot conventionele op membranen gebaseerde platforms, biedt de μSiM experimentalisten nieuwe mogelijkheden, waaronder beeldvorming van levende cellen, ongehinderde paracriene signalering tussen 'bloed'- en 'hersen'-kamers, en de mogelijkheid om immunofluorescentie direct in beeld te brengen zonder de noodzaak van extractie/hermontage van membranen. Hier demonstreren we het basisgebruik van het platform om monocultuur (endotheelcellen) en co-cultuur (endotheelcellen en pericyten) modellen van de BBB op te zetten met behulp van ultradunne nanoporeuze siliciumnitridemembranen. We tonen compatibiliteit aan met zowel primaire celculturen als humane geïnduceerde pluripotente stamcelculturen (hiPSC). We bieden methoden voor kwalitatieve analyse van BBB-modellen via immunofluorescentiekleuring en demonstreren het gebruik van de μSiM voor de kwantitatieve beoordeling van de barrièrefunctie in een permeabiliteitstest van kleine moleculen. De aangeboden methoden moeten gebruikers in staat stellen hun barrièremodellen op het platform vast te stellen, waardoor het gebruik van weefselchiptechnologie voor het bestuderen van menselijke weefsels wordt bevorderd.