Halvautomatisk isolering af den stromale vaskulære fraktion fra murine hvidt fedtvæv ved hjælp af en vævsdissociator

In vitro-undersøgelsen af hvid, brun og beige adipocytdifferentiering muliggør undersøgelse af celleautonome funktioner af adipocytter og deres mekanismer. Udødeliggjorte hvide preadipocytcellelinjer er offentligt tilgængelige og meget udbredt. Imidlertid er fremkomsten af beige adipocytter i hvidt fedtvæv som reaktion på eksterne signaler vanskeligt at rekapitulere i fuldt omfang ved hjælp af offentligt tilgængelige hvide adipocytcellelinjer. Isolering af den stromale vaskulære fraktion (SVF) fra murine fedtvæv udføres almindeligvis for at opnå primære preadipocytter og udføre adipocytdifferentiering. Imidlertid kan hakket og kollagenasefordøjelse af fedtvæv i hånden resultere i eksperimentel variation og er tilbøjelig til forurening. Her præsenterer vi en modificeret halvautomatisk protokol, der anvender en vævsdissociator til kollagenasefordøjelse for at opnå lettere isolering af SVF med det formål at reducere eksperimentel variation, reducere forurening og øge reproducerbarheden. De opnåede preadipocytter og differentierede adipocytter kan anvendes til funktionelle og mekanistiske analyser.