Semi-geautomatiseerde isolatie van de stromale vasculaire fractie uit muizenwit vetweefsel met behulp van een weefseldissociator

De in vitro studie van witte, bruine en beige adipocytendifferentiatie maakt het mogelijk om celautonome functies van adipocyten en hun mechanismen te onderzoeken. Vereeuwigde witte preadipocytencellijnen zijn openbaar beschikbaar en worden veel gebruikt. De opkomst van beige adipocyten in wit vetweefsel als reactie op externe signalen is echter moeilijk volledig samen te vatten met behulp van openbaar beschikbare witte adipocytencellijnen. Isolatie van de stromale vasculaire fractie (SVF) uit muizenvetweefsel wordt vaak uitgevoerd om primaire preadipocyten te verkrijgen en adipocytendifferentiatie uit te voeren. Het hakken en collagenaseverteren van vetweefsel met de hand kan echter resulteren in experimentele variatie en is gevoelig voor besmetting. Hier presenteren we een aangepast semi-geautomatiseerd protocol dat een weefseldissociator gebruikt voor collagenasevertering om een eenvoudigere isolatie van de SVF te bereiken, met als doel experimentele variatie te verminderen, verontreiniging te verminderen en de reproduceerbaarheid te vergroten. De verkregen preadipocyten en gedifferentieerde adipocyten kunnen worden gebruikt voor functionele en mechanistische analyses.