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Abstract
Biology
L’étude in vitro de la différenciation des adipocytes blancs, bruns et beiges permet d’étudier les fonctions autonomes cellulaires des adipocytes et leurs mécanismes. Les lignées cellulaires de préadipocytes blancs immortalisés sont accessibles au public et largement utilisées. Cependant, l’émergence d’adipocytes beiges dans le tissu adipeux blanc en réponse à des signaux externes est difficile à récapituler dans son intégralité en utilisant des lignées cellulaires adipocytaires blanches accessibles au public. L’isolement de la fraction vasculaire stromale (SVF) du tissu adipeux murin est couramment exécuté pour obtenir des préadipocytes primaires et effectuer la différenciation des adipocytes. Cependant, le hachage et la digestion de la collagénase du tissu adipeux à la main peuvent entraîner des variations expérimentales et sont sujets à la contamination. Ici, nous présentons un protocole semi-automatisé modifié qui utilise un dissociateur tissulaire pour la digestion de la collagénase afin d’isoler plus facilement la SVF, dans le but de réduire la variation expérimentale, de réduire la contamination et d’augmenter la reproductibilité. Les préadipocytes obtenus et les adipocytes différenciés peuvent être utilisés pour des analyses fonctionnelles et mécanistes.
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