Semi-automatisert isolering av den stromale vaskulære fraksjonen fra murine hvitt fettvev ved bruk av en vevsdissosiator

In vitro-studien av hvit, brun og beige adipocytterdifferensiering muliggjør undersøkelse av celleautonome funksjoner av adipocytter og deres mekanismer. Immortaliserte hvite preadipocyttcellelinjer er offentlig tilgjengelige og mye brukt. Imidlertid er fremveksten av beige adipocytter i hvitt fettvev som respons på eksterne signaler vanskelig å rekapitulere i full grad ved bruk av offentlig tilgjengelige hvite adipocyttcellelinjer. Isolering av stromal vaskulær fraksjon (SVF) fra murine fettvev utføres vanligvis for å oppnå primære preadipocytter og utføre adipocytdifferensiering. Imidlertid kan hakking og kollagenase fordøyelse av fettvev for hånd resultere i eksperimentell variasjon og er utsatt for forurensning. Her presenterer vi en modifisert halvautomatisert protokoll som bruker en vevsdissosiator for kollagenasefordøyelse for å oppnå lettere isolering av SVF, med sikte på å redusere eksperimentell variasjon, redusere forurensning og øke reproduserbarheten. De oppnådde preadipocytter og differensierte adipocytter kan brukes til funksjonelle og mekanistiske analyser.