Montering og drift af et køletrin for at immobilisere C. elegans på deres kulturplader

Højopløselige in vivo-mikroskopimetoder kan afsløre subtile oplysninger og fine detaljer inde i modeldyret Caenorhabditis elegans (C. elegans), men kræver stærk dyreimmobilisering for at forhindre bevægelsessløring i billederne. Desværre kræver de fleste nuværende immobiliseringsteknikker en betydelig manuel indsats, hvilket giver billeddannelse i høj opløsning lav gennemstrømning. Immobilisering af C. elegans er stærkt forenklet ved hjælp af en kølemetode, der let kan immobilisere hele populationer direkte på deres dyrkningsplader. Køletrinnet kan etablere og opretholde en lang række temperaturer med en ensartet fordeling på dyrkningspladen. I denne artikel dokumenteres hele processen med at opbygge køletrinnet. Målet er, at en typisk forsker uden problemer kan opbygge et operationelt køletrin i deres laboratorium efter denne protokol. Udnyttelse af køletrinnet efter tre protokoller vises, og hver protokol har fordele for forskellige eksperimenter. Der vises også et eksempel på køleprofil af scenen, når den nærmer sig sin endelige temperatur og nogle nyttige tip til brug af køleimmobilisering.