Abstract
Biology
Hoge resolutie in vivo microscopiebenaderingen kunnen subtiele informatie en fijne details in het modeldier Caenorhabditis elegans (C. elegans) onthullen, maar vereisen een sterke immobilisatie van dieren om bewegingsonscherpte in de beelden te voorkomen. Helaas vereisen de meeste huidige immobilisatietechnieken aanzienlijke handmatige inspanningen, waardoor beeldvorming met hoge resolutie een lage doorvoer heeft. Immobilisatie van C. elegans wordt sterk vereenvoudigd door een koelbenadering te gebruiken die gemakkelijk hele populaties direct op hun teeltplaten kan immobiliseren. De koelfase kan een breed temperatuurbereik vaststellen en handhaven met een uniforme verdeling op de teeltplaat. In dit artikel wordt het hele proces van het bouwen van de koelfase gedocumenteerd. Het is de bedoeling dat een doorsnee onderzoeker volgens dit protocol zonder problemen een operationele koeltrap in zijn laboratorium kan bouwen. Het gebruik van de koelfase volgens drie protocollen wordt getoond en elk protocol heeft voordelen voor verschillende experimenten. Ook wordt een voorbeeld van een koelprofiel van het podium getoond terwijl het zijn eindtemperatuur nadert en enkele nuttige tips voor het gebruik van koelimmobilisatie.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved