Assemblage et fonctionnement d’une platine de refroidissement pour immobiliser C. elegans sur leurs plaques de culture

Les approches de microscopie in vivo à haute résolution peuvent révéler des informations subtiles et des détails fins à l’intérieur de l’animal modèle Caenorhabditis elegans (C. elegans), mais nécessitent une forte immobilisation de l’animal pour éviter le flou de mouvement dans les images. Malheureusement, la plupart des techniques d’immobilisation actuelles nécessitent un effort manuel considérable, ce qui rend l’imagerie haute résolution à faible débit. L’immobilisation de C. elegans est grandement simplifiée en utilisant une approche de refroidissement qui peut facilement immobiliser des populations entières directement sur leurs plaques de culture. L’étape de refroidissement peut établir et maintenir une large plage de températures avec une répartition uniforme sur la plaque de culture. Dans cet article, l’ensemble du processus de construction de l’étape de refroidissement est documenté. L’objectif est qu’un chercheur typique puisse construire un étage de refroidissement opérationnel dans son laboratoire en suivant ce protocole sans difficulté. L’utilisation de l’étape de refroidissement suivant trois protocoles est montrée, et chaque protocole présente des avantages pour différentes expériences. On y trouve également un exemple de profil de refroidissement de la scène à l’approche de sa température finale et quelques conseils utiles sur l’utilisation de l’immobilisation de refroidissement.