Сборка и эксплуатация ступени охлаждения для иммобилизации C. elegans на их культуральных пластинах

Подходы к микроскопии in vivo с высоким разрешением могут выявить тонкую информацию и мелкие детали внутри модельного животного Caenorhabditis elegans (C. elegans), но требуют сильной иммобилизации животных для предотвращения размытия изображения при движении. К сожалению, большинство современных методов иммобилизации требуют значительных ручных усилий, что делает визуализацию с высоким разрешением низкопроизводительной. Иммобилизация C. elegans значительно упрощается за счет использования подхода к охлаждению, который может легко обездвижить целые популяции непосредственно на их культивационных пластинах. Ступень охлаждения может устанавливать и поддерживать широкий диапазон температур с равномерным распределением на культивационной пластине. В этой статье задокументирован весь процесс построения ступени охлаждения. Цель состоит в том, чтобы типичный исследователь мог без труда построить операционную ступень охлаждения в своей лаборатории, следуя этому протоколу. Показано использование ступени охлаждения по трем протоколам, и каждый протокол имеет преимущества для разных экспериментов. Также показан пример профиля охлаждения ступени по мере приближения к конечной температуре и несколько полезных советов по использованию охлаждающей иммобилизации.