Montaje y operación de una etapa de enfriamiento para inmovilizar C. elegans en sus placas de cultivo

Los enfoques de microscopía in vivo de alta resolución pueden revelar información sutil y detalles finos dentro del animal modelo Caenorhabditis elegans (C. elegans), pero requieren una fuerte inmovilización animal para evitar el desenfoque de movimiento en las imágenes. Desafortunadamente, la mayoría de las técnicas de inmovilización actuales requieren un esfuerzo manual sustancial, lo que hace que las imágenes de alta resolución tengan un rendimiento bajo. La inmovilización de C. elegans se simplifica enormemente mediante el uso de un enfoque de enfriamiento que puede inmovilizar fácilmente poblaciones enteras directamente en sus placas de cultivo. La etapa de enfriamiento puede establecer y mantener un amplio rango de temperaturas con una distribución uniforme en la placa de cultivo. En este artículo, se documenta todo el proceso de construcción de la etapa de enfriamiento. El objetivo es que un investigador típico pueda construir una etapa de enfriamiento operacional en su laboratorio siguiendo este protocolo sin dificultad. Se muestra la utilización de la etapa de enfriamiento siguiendo tres protocolos, y cada protocolo tiene ventajas para diferentes experimentos. También se muestra un ejemplo de perfil de enfriamiento de la etapa a medida que se acerca a su temperatura final y algunos consejos útiles para usar la inmovilización de enfriamiento.