Montering och drift av ett kylsteg för att immobilisera C. elegans på sina odlingsplattor

Högupplösta in vivo-mikroskopimetoder kan avslöja subtil information och fina detaljer inuti modelldjuret Caenorhabditis elegans (C. elegans), men kräver stark djurimmobilisering för att förhindra rörelseoskärpa i bilderna. Tyvärr kräver de flesta nuvarande immobiliseringstekniker betydande manuell ansträngning, vilket gör högupplöst bildbehandling med låg genomströmning. Immobilisering av C. elegans förenklas kraftigt genom att använda en kylningsmetod som lätt kan immobilisera hela populationer direkt på sina odlingsplattor. Kylsteget kan etablera och upprätthålla ett brett temperaturområde med en jämn fördelning på odlingsplattan. I den här artikeln dokumenteras hela processen med att bygga kylsteget. Målet är att en typisk forskare utan svårighet kan bygga ett operativt kylsteg i sitt laboratorium enligt detta protokoll. Användning av kylsteget efter tre protokoll visas, och varje protokoll har fördelar för olika experiment. Dessutom visas ett exempel på en kylprofil för scenen när den närmar sig sin slutliga temperatur och några användbara tips för att använda kylimmobilisering.