Abstract
Biology
Yüksek çözünürlüklü in vivo mikroskopi yaklaşımları, model hayvan Caenorhabditis elegans (C. elegans) içindeki ince bilgileri ve ince ayrıntıları ortaya çıkarabilir, ancak görüntülerde hareket bulanıklığını önlemek için güçlü hayvan immobilizasyonu gerektirir. Ne yazık ki, en güncel immobilizasyon tekniklerinin çoğu, yüksek çözünürlüklü görüntülemeyi düşük verimli hale getiren önemli miktarda manuel çaba gerektirir. C. elegans'ın immobilizasyonu, tüm popülasyonları doğrudan yetiştirme plakalarında kolayca hareketsiz hale getirebilen bir soğutma yaklaşımı kullanılarak büyük ölçüde basitleştirilmiştir. Soğutma aşaması, yetiştirme plakası üzerinde eşit bir dağılıma sahip çok çeşitli sıcaklıklar oluşturabilir ve koruyabilir. Bu makalede, soğutma aşamasını inşa etme sürecinin tamamı belgelenmiştir. Amaç, tipik bir araştırmacının bu protokolü takiben laboratuvarlarında zorlanmadan operasyonel bir soğutma aşaması oluşturabilmesidir. Üç protokolü takip eden soğutma aşamasının kullanımı gösterilmiştir ve her protokolün farklı deneyler için avantajları vardır. Ayrıca, son sıcaklığına yaklaşırken sahnenin örnek bir soğutma profili ve soğutma immobilizasyonunun kullanılmasında bazı yararlı ipuçları da gösterilmiştir.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved