Un essai biologique in vivo à haute résolution sur l’hydratation du pollen à grain unique pour Arabidopsis thaliana

La reproduction sexuée chez les plantes à fleurs nécessite une interaction initiale entre le grain de pollen et la surface stigmatique, où un dialogue moléculaire est établi entre les partenaires en interaction. Des études portant sur diverses espèces ont révélé qu’une série de points de contrôle moléculaires régulent l’interaction pollen-stigmate pour s’assurer que seul le pollen compatible, généralement intraspécifique, réussit à effectuer la fécondation. Chez les espèces qui possèdent un « stigmate sec », comme la plante modèle Arabidopsis thaliana, le premier point de contrôle de compatibilité prézygote post-pollinisation est l’établissement de l’hydratation du pollen.

Cette phase de pollinisation est étroitement réglementée, les signaux du grain de pollen suscitant la libération d’eau du stigmate, permettant ainsi l’hydratation du pollen. La capacité de mesurer et de suivre avec précision l’hydratation du pollen au fil du temps est essentielle à la conception d’expériences visant à comprendre la régulation de cette étape critique de la reproduction. Les protocoles publiés utilisent fréquemment des fleurs qui ont été excisées de la plante mère, maintenues sur des milieux liquides ou solides et pollinisées en vrac.

Cet article décrit un essai biologique de pollinisation in vivo non invasif qui permet un suivi minute par minute de l’hydratation des grains de pollen individuels d’A. thaliana à haute résolution. Le test est hautement reproductible, capable de détecter des variations très subtiles des profils d’hydratation du pollen, et convient donc à l’analyse des mutants qui affectent les voies régulant la pollinisation. Bien que le protocole soit plus long que ceux décrits pour les pollinisations en vrac, la précision et la reproductibilité qu’il fournit, ainsi que sa nature in vivo , le rendent idéal pour la dissection détaillée des phénotypes de pollinisation.