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Biology

シロイヌナズナの高分解能単粒in in vivo花粉水和バイオアッセイ

Published: June 30th, 2023

DOI:

10.3791/65280

Abstract

顕花植物の有性生殖は、花粉粒と柱頭表面との間の最初の相互作用を必要とし、そこで相互作用するパートナー間で分子対話が確立される。さまざまな種にわたる研究により、一連の分子チェックポイントが花粉と柱頭の相互作用を調節して、互換性のある、一般的に種内花粉のみが受精に成功することを保証することが明らかになりました。モデル植物 シロイヌナズナのような「乾いた柱頭」を持つ種では、受粉後最初の接合前適合性チェックポイントは花粉水分補給の確立です。

受粉のこの段階は厳しく規制されており、花粉粒からの信号が柱頭からの水分の放出を誘発し、花粉の水和を可能にします。花粉の水和を経時的に正確に測定および追跡する能力は、生殖におけるこの重要なステップの調節を理解することを目的とした実験計画の鍵となります。公開されたプロトコルは、親植物から切り取られ、液体または固体培地で維持され、大量受粉された花を頻繁に利用します。

この論文では、個々のA.タリアナ花粉粒の分ごとの水和追跡を可能にする非侵襲的なin vivo受粉バイオアッセイについて説明します。このアッセイは再現性が高く、花粉の水和プロファイルの非常に微妙な変動を検出できるため、受粉を調節する経路に影響を与える変異体の分析に適しています。このプロトコルは、バルク受粉について説明したものよりも長いですが、それが提供する精度と再現性は、そのin vivoの性質とともに、受粉表現型の詳細な解剖に理想的です。

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