A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Abstract
Biology
Xenopus har været stærke modelorganismer til forståelse af hvirveldyrs udvikling og sygdom i over 100 år. Her defineres en hurtig blodperfusionsprotokol i Xenopus, der sigter mod en konsekvent og drastisk reduktion af blod i alle væv. Perfusion udføres ved at indsætte en nål direkte i hjertets ventrikel og pumpe hepariniseret fosfatbufret saltvand (PBS) gennem vaskulærsystemet. Proceduren kan gennemføres på ca. 10 minutter pr. dyr. Blodet domineres af nogle få meget rigelige proteiner og celletyper, hvilket skaber mange problemer, da disse proteiner maskerer de fleste andre molekyler og celletyper af interesse. Den reproducerbare karakterisering af voksent Xenopus-væv med kvantitativ proteomics og enkeltcelle transkriptomics vil drage fordel af at anvende denne protokol før organprøveudtagning. Protokollerne for vævsprøvetagning er defineret i ledsagende papirer. Disse procedurer er rettet mod standardisering af praksis på tværs af Xenopus af forskelligt køn, alder og sundhedsstatus, specifikt X. laevis og X. tropicalis.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved