Optimierung der Leistungsparameter des TAGGG Telomerlängen-Assays

Telomere sind sich wiederholende Sequenzen, die an den Chromosomenenden vorhanden sind. Ihre Verkürzung ist ein charakteristisches Merkmal menschlicher Körperzellen. Die Verkürzung tritt aufgrund eines Problems mit der Endreplikation und des Fehlens des Telomerase-Enzyms auf, das für die Aufrechterhaltung der Telomerlänge verantwortlich ist. Interessanterweise verkürzen sich Telomere auch als Reaktion auf verschiedene interne physiologische Prozesse wie oxidativen Stress und Entzündungen, die durch extrazelluläre Stoffe wie Schadstoffe, Infektionserreger, Nährstoffe oder Strahlung beeinflusst werden können. Somit dient die Telomerlänge als hervorragender Biomarker für das Altern und verschiedene physiologische Gesundheitsparameter. Das TAGGG Telomerlängen-Assay-Kit wird zur Quantifizierung der durchschnittlichen Telomerlängen mit dem Telomerrestriktionsfragment (TRF)-Assay verwendet und ist hochgradig reproduzierbar. Es handelt sich jedoch um eine teure Methode, die daher nicht routinemäßig für große Stichprobenzahlen eingesetzt wird. In dieser Arbeit beschreiben wir ein detailliertes Protokoll für eine optimierte und kostengünstige Messung der Telomerlänge mittels Southern Blots oder TRF-Analyse und nicht-radioaktiver Chemilumineszenz-basierter Detektion.