A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
עוברי צרעת נסוניה נותחו מגלמי Lucillia sericata לאחר טפילים במשך 12-24 שעות ונשטפו בתמיסת אלכוהול ונתרן היפוכלוריט 10% כדי להשיג עוברים נטולי חיידקים. לאחר גידול העוברים נטולי הנבט ואספקת מצע גידול נסוניה, כדי לגדול ולהתפתח במבחנה, התקבלו בוגרים נטולי חיידקים של נסוניה.
טכנולוגיית גידול אספטי היא שיטה לגידול חרקים בתנאים סטריליים או כמעט סטריליים, אשר יכולה לחסל ביעילות את ההשפעה של מיקרואורגניזמים חיצוניים על מיקרוביוטה של חרקים ובכך לקדם את ההתפתחות המהירה של מחקר מיקרוביוטה חרקים. נסוניה (סוג צרעה) הוא חרק צרעה טפילי בעל יתרונות רבים, כגון תוחלת חיים קצרה, שונות גנטית גבוהה, תפעול קל ועוד, ונמצא בשימוש נרחב כמערכת מודל חרקים. שלא כמו טיפול אנטיביוטי, אשר יכול רק להפחית את מספר המיקרואורגניזמים בבעלי חיים, טכניקות גידול אספטיות יכולות לשלוט הן על הרכב וכמות מיקרואורגניזמים בבעלי חיים, מה שמקל עוד יותר על המחקר של אינטראקציות מיקרואורגניזם מארח. עם זאת, גרסאות קודמות של מדיום גידול Nasonia (NRM) יש כמה פגמים ובעיות, כגון תהליך הכנה מורכב וגוזל זמן, זיהום קל על ידי חיידקים או פטריות, וזמן אחסון קצר. לכן, מחקר זה פותר בעיות אלה על ידי אופטימיזציה של הכלים המשמשים בתהליך הכנת NRM, תנאי אחסון ויחסי רכיבים. התווך הממוטב יכול לאפשר אחסון בטמפרטורה של -20°C למשך 3 חודשים לפחות ולמנוע את האפשרות של זיהום NRM במהלך האכלת צרעות סטריליות. זה משפר עוד יותר את שיעור ההישרדות ואת רמת הבריאות של Nasonia אספטית, אשר חשוב לשימוש Nasonia כמודל למחקר מיקרוביאלי.
בעלי חיים נטולי חיידקים הם בעלי חיים שאין להם מיקרואורגניזמים חיים וטפילים הניתנים לזיהוי1. ניתן להשיג עוברים נטולי חיידקים על ידי ניתוח האם בתנאים אספטיים ולאחר מכן לגדלם במערכות מחסום2. בעלי חיים כאלה יכולים לשמש לחקר ההשפעות של מיקרואורגניזמים על בעלי חיים, כגון על המיקרוביוטה של המעי, מערכת החיסון וחילוף החומרים1. באמצעים טכניים מסוימים, חרקים רבים ואפילו יונקים יכולים להפוך לסטריליים 3,4. לבעלי חיים נטולי חיידקים יש תפקיד ייחודי והם נמצאים בשימוש נרחב בהיבטים שונים של מחקר מיקרוביולוגי5. ל....
1. הכנתמדיום גידולנסוניה ללא חיידקים
יעילות ההכנה של NRM שופרה מאוד על ידי שיפור כלי ההכנה. בנוסף, בעיית זיהום NRM בתהליך ההזנה בוטלה על ידי אופטימיזציה של האסטרטגיה ושיטת השימור. יחד עם זאת, ל-NRM המותאם היה יחס תזונתי מתאים יותר לגדילה והתפתחות של צרעות נטולות חיידקים עם L. sericata כפונדקאים. שיעור ההישרדות של צרעות נטולות חיידק.......
עם היישום של טכנולוגיות זיהוי תפוקה גבוהה כגון גנומיקה ומטבולומיקה, חוקרים הבינו בהדרגה שיש מגוון גנטי עצום ומורכבות מטבולית במיקרוביוטה של המעי16. חיידקים סימביוטיים אלה קשורים קשר הדוק למצבים פיזיולוגיים או פתולוגיים שונים, כגון מטבוליזם תזונתי של המאכסן, גידולים, חסינות ?.......
מימון: עבודה זו נתמכה על ידי הקרן הלאומית למדע של סין (32270538), תוכנית המו"פ הלאומית של סין (2022YFF0710603), הקרן למדעי הטבע של בייג'ינג (6222046), והמימון האסטרטגי של CAS באמצעות תוכנית המימון CAS-CSIRO (152111KYSB20210011) שהוענק ל- G.H.W. תרומות מחברים: כל המחברים פיתחו את היקף ומיקוד הסקירה ותרמו לכתיבת כתב היד.
....Name | Company | Catalog Number | Comments |
0.22 Sterile vacuum filter | NEST | 331011 | |
10% SodiumHypochlorite | LIRCON | XB-84BS-1 | |
1x PBS solution | Solarbio | P1020 | |
200 mesh nylon net | BIOBYING | BY-378Z | |
24 well-plate | NEST | 702001 | |
8, 1.2, 0.8, and 0.45 µm filters | Shanghai Xingya Purification Material Factory | HN-AA-JT-10079 | |
Absolute ethyl alcohol | Macklin | E809057-500ml | |
Cell Strainer | BIOLOGIX | 15-1100 | |
Commercial Drosophila Medium | Boer | B645446-500ml | |
Dissecting needle | Bioroyee | 17-9140 | |
Garlic press | Taobao | No Catalog numbers | Purchase on Taobao |
Lucillia sericata pupae | Hefei Dayuan Biotechnology Co., Ltd. | No Catalog numbers | Purchase on Taobao |
Small writing brush | Cestidur | BL0508 | |
Stereoscope | SOPTOP | RX50 | |
Tweezers | SALMART | A109001-56 |
Explore More Articles
This article has been published
Video Coming Soon
ABOUT JoVE
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved