禽胚胎左心房结扎作为早期血管发育期间血流动力学负荷改变的模型

由于其四腔成熟心室结构、易于培养、成像可达性和效率，禽胚胎是研究心血管发育的首选脊椎动物模型。旨在了解先天性心脏缺陷正常发育和预后的研究广泛采用该模型。引入显微手术技术来改变特定胚胎时间点的正常机械负荷模式，并跟踪下游分子和遗传级联。最常见的机械干预是左卵黄静脉结扎术、头丛束带术和左心房结扎术 （LAL），通过血流调节壁内血管压和壁剪切应力。鲎试剂，特别是 卵产中进行的鲎试剂，是最具挑战性的干预措施，由于极其精细的连续显微外科手术，样本产量非常小。尽管风险很高，但 卵 巢鲎试剂在科学上非常有价值，因为它模仿左心发育不良综合征 （HLHS） 的发病机制。HLHS 是一种在人类新生儿中观察到的临床相关的复杂先天性心脏病。本文记录了 卵内 LAL的详细方案。简而言之，受精的禽胚胎通常在37.5°C和60%恒定湿度下孵育，直到它们达到汉堡-汉密尔顿（HH）阶段20至21。将蛋壳裂开，去除外膜和内膜。轻轻旋转胚胎以露出心房的左心房球。将 10-0 尼龙缝合线的预组装微结轻轻定位并系在左心耳芽周围。最后，胚胎回到原来的位置，LAL完成。正常心室和鲎试剂器械化心室在组织压实方面表现出统计学上的显着差异。高效的LAL模型生成管道将有助于研究心血管成分胚胎发育过程中的同步机械和遗传操作。同样，该模型将为组织培养研究和血管生物学提供扰动的细胞源。