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Abstract

Neuroscience

从胚胎小鼠大脑中建立混合神经元和神经胶质细胞培养物以研究感染和先天免疫

Published: June 30th, 2023

DOI:

10.3791/65331

1School of Infection and Immunity, University of Glasgow, 2Faculty of Science and Technology, Institute of Technology, University of Tartu

Abstract

中枢神经系统(CNS)的模型必须概括 体内发现 的相互连接的细胞的复杂网络。中枢神经系统主要由神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞组成。由于越来越多的努力替代和减少动物的使用,已经开发了各种 体外 细胞培养系统来探索先天细胞特性,从而可以开发针对CNS感染和病理的治疗方法。虽然某些研究问题可以通过基于人类的细胞培养系统来解决,例如(诱导的)多能干细胞,但与人类细胞一起工作在可用性、成本和伦理方面有其自身的局限性。在这里,我们描述了一种从胚胎小鼠大脑中分离和培养细胞的独特方案。由此产生的混合神经细胞培养物模拟 体内大脑中发现的几种细胞群和相互作用。与目前的等效方法相比,该协议更接近于模拟大脑的特征,并且还获得了更多的细胞,从而允许从一只怀孕的小鼠中研究更多的实验条件。此外,该协议相对容易且高度可重复。这些培养物已经过优化,可用于各种规模,包括基于 96 孔的高通量筛选、24 孔显微镜分析和用于流式细胞术和逆转录定量聚合酶链反应 (RT-qPCR) 分析的 6 孔培养物。这种培养方法是在CNS的一些复杂性背景下研究感染和免疫力的有力工具,并且体 方法很方便。

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