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Abstract

Biology

使用细胞器特异性染料检测 秀丽隐杆 线虫和哺乳动物细胞中的线粒体自噬

Published: May 19th, 2023

DOI:

10.3791/65337

Abstract

线粒体对于各种生物学功能至关重要,包括能量产生、脂质代谢、钙稳态、血红素生物合成、调节细胞死亡和活性氧 (ROS) 的产生。ROS对于关键的生物过程至关重要。然而,如果不加以控制,它们会导致氧化损伤,包括线粒体损伤。受损的线粒体释放更多的ROS,从而加剧细胞损伤和疾病状态。一种称为线粒体自噬(线粒体自噬)的稳态过程选择性地去除受损的线粒体,然后被新的线粒体取代。有多种线粒体自噬途径,共同的终点是溶酶体中受损线粒体的分解。

包括遗传传感器、抗体免疫荧光和电子显微镜在内的几种方法使用该终点来量化线粒体自噬。每种检查线粒体自噬的方法都有其优点,例如特定的组织/细胞靶向(使用遗传传感器)和出色的细节(使用电子显微镜)。然而,这些方法通常需要昂贵的资源,训练有素的人员,以及在实际实验之前漫长的准备时间,例如用于创造转基因动物。在这里,我们提出了一种具有成本效益的替代方案,用于使用靶向线粒体和溶酶体的市售荧光染料测量线粒体自噬。该方法有效地测量线虫秀 丽隐杆 线虫和人肝细胞中的线粒体自噬,这表明其在其他模型系统中的潜在效率。

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