ऑर्गेनेल-विशिष्ट रंगों का उपयोग करके केनोरहाब्डिस एलिगेंस और स्तनधारी कोशिकाओं में मिटोफैगी का पता लगाना

माइटोकॉन्ड्रिया ऊर्जा उत्पादन, लिपिड चयापचय, कैल्शियम होमियोस्टैसिस, हीम बायोसिंथेसिस, विनियमित कोशिका मृत्यु और प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों (आरओएस) की पीढ़ी सहित विभिन्न जैविक कार्यों के लिए आवश्यक हैं। आरओएस प्रमुख जैविक प्रक्रियाओं के लिए महत्वपूर्ण हैं। हालांकि, अनियंत्रित होने पर, वे माइटोकॉन्ड्रियल क्षति सहित ऑक्सीडेटिव चोट का कारण बन सकते हैं। क्षतिग्रस्त माइटोकॉन्ड्रिया अधिक आरओएस जारी करते हैं, जिससे सेलुलर चोट और रोग की स्थिति तेज हो जाती है। माइटोकॉन्ड्रियल ऑटोफैगी (माइटोफैगी) नामक एक होमियोस्टैटिक प्रक्रिया चुनिंदा रूप से क्षतिग्रस्त माइटोकॉन्ड्रिया को हटा देती है, जिसे बाद में नए लोगों द्वारा प्रतिस्थापित किया जाता है। कई माइटोफैगी मार्ग हैं, जिनमें सामान्य समापन बिंदु लाइसोसोम में क्षतिग्रस्त माइटोकॉन्ड्रिया का टूटना है।

आनुवंशिक सेंसर, एंटीबॉडी इम्यूनोफ्लोरेसेंस और इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी सहित कई पद्धतियां, माइटोफैगी को मापने के लिए इस समापन बिंदु का उपयोग करती हैं। माइटोफैगी की जांच करने के लिए प्रत्येक विधि के अपने फायदे हैं, जैसे कि विशिष्ट ऊतक / सेल लक्ष्यीकरण (आनुवंशिक सेंसर के साथ) और महान विवरण (इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी के साथ)। हालांकि, इन विधियों को अक्सर महंगे संसाधनों, प्रशिक्षित कर्मियों और वास्तविक प्रयोग से पहले एक लंबी तैयारी के समय की आवश्यकता होती है, जैसे कि ट्रांसजेनिक जानवरों को बनाने के लिए। यहां, हम माइटोकॉन्ड्रिया और लाइसोसोम को लक्षित करने वाले व्यावसायिक रूप से उपलब्ध फ्लोरोसेंट रंगों का उपयोग करके माइटोफैगी को मापने के लिए एक लागत प्रभावी विकल्प प्रस्तुत करते हैं। यह विधि नेमाटोड केनोरहाब्डिस एलिगेंस और मानव यकृत कोशिकाओं में माइटोफैगी को प्रभावी ढंग से मापती है, जो अन्य मॉडल प्रणालियों में इसकी संभावित दक्षता को इंगित करती है।