オルガネラ特異的色素を用いた カエノラブディティス・エレガンス および哺乳類細胞におけるマイトファジーの検出

ミトコンドリアは、エネルギー生産、脂質代謝、カルシウム恒常性、ヘム生合成、細胞死の制御、活性酸素種(ROS)の生成など、さまざまな生物学的機能に不可欠です。ROSは重要な生物学的プロセスに不可欠です。ただし、制御されていない場合、ミトコンドリアの損傷を含む酸化的損傷を引き起こす可能性があります。損傷したミトコンドリアはより多くのROSを放出し、それによって細胞傷害および疾患状態を強める。ミトコンドリアオートファジー(マイトファジー)と呼ばれる恒常性維持プロセスは、損傷したミトコンドリアを選択的に除去し、その後、新しいミトコンドリアに置き換えられます。複数のマイトファジー経路があり、共通のエンドポイントはリソソームの損傷したミトコンドリアの分解です。

遺伝子センサー、抗体免疫蛍光法、電子顕微鏡法などのいくつかの方法論では、このエンドポイントを使用してマイトファジーを定量化します。マイトファジーを調べるための各方法には、特定の組織/細胞の標的化(遺伝子センサーを使用)や非常に詳細(電子顕微鏡を使用)などの利点があります。しかしながら、これらの方法は、しばしば高価な資源、訓練を受けた人員、およびトランスジェニック動物の作成などの実際の実験の前に長い準備時間を必要とする。ここでは、ミトコンドリアとリソソームを標的とする市販の蛍光色素を使用してマイトファジーを測定するための費用対効果の高い代替手段を紹介します。この方法は、線虫カ エノラブディティスエレガンス とヒト肝細胞のマイトファジーを効果的に測定し、他のモデルシステムでの潜在的な効率を示しています。