Universal molekylær retention med 11 gange ekspansionsmikroskopi

Nanoskala billeddannelse af biologiske prøver kan forbedre forståelsen af sygdomspatogenese. I de senere år har ekspansionsmikroskopi (ExM) vist sig at være et effektivt og billigt alternativ til optisk superopløsningsmikroskopi. Det har imidlertid været begrænset af behovet for specifikke og ofte brugerdefinerede forankringsmidler til at bevare forskellige biomolekyleklasser i gelen og af vanskeligheder med at udvide standard kliniske prøveformater, såsom formalinfikseret paraffinindlejret væv, især hvis der ønskes større ekspansionsfaktorer eller konserverede proteinepitoper. Her beskriver vi Magnify, en ny ExM-metode til robust ekspansion op til 11 gange i en lang række vævstyper. Ved at bruge methacrolein som det kemiske anker mellem vævet og gelen bevarer Magnify flere biomolekyler, såsom proteiner, lipider og nukleinsyrer, i gelen, hvilket muliggør bred nanoskala billeddannelse af væv på konventionelle optiske mikroskoper. Denne protokol beskriver bedste praksis for at sikre robust og revnefri vævsudvidelse samt tip til håndtering og billeddannelse af stærkt ekspanderede geler.