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Abstract

Biology

采用 11 倍扩增显微镜的通用分子保留

Published: October 6th, 2023

DOI:

10.3791/65338

1Department of Biological Sciences, Carnegie Mellon University

Abstract

生物标本的纳米级成像可以提高对疾病发病机制的认识。近年来,扩展显微镜(ExM)已被证明是光学超分辨率显微镜的有效且低成本的替代方案。然而,由于需要特定的且通常是定制的锚定剂来保留凝胶内不同的生物分子类别,以及难以扩展标准临床样品形式(例如福尔马林固定石蜡包埋的组织),特别是如果需要更大的扩增因子或保留的蛋白质表位,它受到了限制。在这里,我们描述了Magnify,这是一种新的ExM方法,可在各种组织类型中实现高达11倍的稳健扩增。通过使用甲基丙烯醛作为组织和凝胶之间的化学锚,Magnify在凝胶中保留了多种生物分子,例如蛋白质,脂质和核酸,从而允许在传统光学显微镜上对组织进行广泛的纳米级成像。该协议描述了确保稳定和无裂纹组织扩增的最佳实践,以及处理和成像高度扩增凝胶的技巧。

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