Generación y manipulación de organoides intestinales de rata

Cuando se utilizan organoides para evaluar la fisiología y las decisiones sobre el destino celular, es importante utilizar un modelo que recapitule estrechamente los contextos in vivo . En consecuencia, los organoides derivados del paciente se utilizan para el modelado de enfermedades, el descubrimiento de fármacos y la detección de tratamientos personalizados. Los organoides intestinales de ratón se utilizan comúnmente para comprender aspectos tanto de la función/fisiología intestinal como de la dinámica/decisión de destino de las células madre. Sin embargo, en muchos contextos de enfermedades, a menudo se prefieren las ratas a los ratones como modelo debido a su mayor similitud fisiológica con los humanos en términos de fisiopatología de la enfermedad. El modelo de rata se ha visto limitado por la falta de herramientas genéticas disponibles in vivo, y los organoides intestinales de rata han demostrado ser frágiles y difíciles de cultivar a largo plazo. Aquí, nos basamos en protocolos publicados anteriormente para generar organoides intestinales de ratas de forma robusta a partir del duodeno y el yeyuno. Proporcionamos una visión general de varias aplicaciones posteriores que utilizan organoides intestinales de ratas, incluidos los ensayos de hinchazón funcional, la tinción de montaje completo, la generación de monocapas enteroides, 2D y la transducción lentiviral. El modelo de organoide de rata proporciona una solución práctica a la necesidad del campo de un modelo in vitro que conserve la relevancia fisiológica para los seres humanos, que pueda manipularse genéticamente rápidamente y que se obtenga fácilmente sin las barreras involucradas en la obtención de organoides intestinales humanos.