Generering og manipulering av tarmorganoider fra rotter

Ved bruk av organoider for å vurdere fysiologi og celleskjebnebeslutninger, er det viktig å bruke en modell som nøye rekapitulerer in vivo-sammenhenger . Følgelig brukes pasientavledede organoider til sykdomsmodellering, narkotikaforskning og personlig behandlingsscreening. Intestinale organoider fra mus brukes ofte til å forstå aspekter av både tarmfunksjon/fysiologi og stamcelledynamikk/skjebnebeslutninger. Men i mange sykdomssammenhenger foretrekkes rotter ofte fremfor mus som modell på grunn av deres større fysiologiske likhet med mennesker når det gjelder sykdomspatofysiologi. Rottemodellen har vært begrenset av mangel på genetiske verktøy tilgjengelig in vivo, og tarmorganoider fra rotter har vist seg å være skjøre og vanskelige å dyrke på lang sikt. Her bygger vi på tidligere publiserte protokoller for å robust generere tarmorganoider fra rotter fra tolvfingertarmen og jejunum. Vi gir en oversikt over flere nedstrøms applikasjoner som bruker tarmorganoider fra rotter, inkludert funksjonelle hevelsesanalyser, helmonteringsfarging, generering av 2D enteroidmonolag og lentiviral transduksjon. Rotteorganoidmodellen gir en praktisk løsning på feltets behov for en in vitro-modell som beholder fysiologisk relevans for mennesker, raskt kan manipuleres genetisk og lett oppnås uten barrierene som er involvert i anskaffelse av humane tarmorganoider.