Генерация и манипуляции с органоидами кишечника крыс

При использовании органоидов для оценки физиологии и принятия решений о судьбе клеток важно использовать модель, которая точно повторяет контексты in vivo . Соответственно, органоиды, полученные от пациентов, используются для моделирования заболеваний, разработки лекарств и персонализированного скрининга лечения. Органоиды кишечника мышей обычно используются для понимания аспектов как функции / физиологии кишечника, так и динамики стволовых клеток. Тем не менее, во многих случаях крысы часто предпочтительнее мышей в качестве модели из-за их большего физиологического сходства с людьми с точки зрения патофизиологии заболевания. Модель крыс была ограничена отсутствием генетических инструментов, доступных in vivo, а органоиды кишечника крыс оказались хрупкими и трудно культивируемыми в долгосрочной перспективе. Здесь мы опираемся на ранее опубликованные протоколы для надежной генерации органоидов кишечника крыс из двенадцатиперстной кишки и тощей кишки. Мы представляем обзор нескольких последующих применений с использованием органоидов кишечника крыс, включая функциональный анализ набухания, окрашивание всего маунта, генерацию 2D-энтероидных монослоев и лентивирусную трансдукцию. Модель органоида крысы представляет собой практическое решение потребности в модели in vitro , которая сохраняет физиологическую значимость для человека, может быть быстро генетически изменена и легко получена без барьеров, связанных с получением органоидов кишечника человека.